目的:原发性肝癌包括肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）（占病例的75%-85%）和肝内胆管癌（占病例的10%-15%）和其他罕见类型。每年大约有841,000例新病例,和782,000例死亡。在世界上大多数地区,男性的发病率和死亡率是女性的2到3倍。绝经后女性的HCC发生率增加,而雌激素治疗可以抑制这种现象。HCC女性的预后优于男性。目前,仅索拉非尼和Lenvatinib被批准用于一线药物治疗未切除的晚期HCC,但只能产生一定的生存获益。因此,需要确定新的治疗靶点以改善目前的肝癌治疗水平。以前的研究表明,ERα属于类固醇激素核受体超家族成员之一,通过与配体和转录辅调节因子形成复合物结合到靶基因的反应元件上,改变染色体结构等机制调节基因转录。这预示着新的ERα的辅调节因子或者调控ERα自身翻译后修饰作用机制的研究将为肝细胞肝癌的早期诊断和治疗提供实验依据和新靶点。我们课题组的早期研究报道了MOF与ERα结合在子宫内膜癌中发挥抑癌作用。已有研究发现,MOF作为重要的组蛋白H4K16乙酰转移酶,在大部分原发性肿瘤的发生发展中发挥着重要的抑癌功能。同时除了组蛋白乙酰化修饰外,MOF还可以乙酰化某些非组蛋白,例如P53,FASN,LSD1、No RC和IRF3.过去的研究表明,MOF在肝细胞癌中低表达。MOF低表达预后差。但是MOF如何发挥抑癌作用的机制尚不明确。本课题旨在深入研究MOF稳定ERα蛋白以及作为ERα的辅调节因子在HCC中的生物学功能及其分子机制。研究MOF与HCC发生发展的关联,有望为HCC患者的早期诊断和新靶点治疗提供可靠的实验依据。研究方法:1、本研究首先采用生物信息学的方法预测MOF对肝细胞肝癌临床患者的预后的影响以及m RNA表达水平;利用免疫组化实验检测临床标本中MOF在145例肝细胞肝癌及48例邻近非癌组织中的表达情况;利用Western blot实验方法检测33对配对肝细胞肝癌及癌旁中MOF和ERα的表达趋势。2、利用蛋白质免疫共沉淀实验（Co-IP）和免疫荧光共聚焦显微镜扫描技术明确MOF与ERα是否存在相互作用;利用Western blot实验方法检测MOF过表达或敲减对ERα的m RNA和蛋白的影响。3、利用乙酰化修饰实验方法检测MOF过表达或敲减以及MOF乙酰转移酶抑制剂MG149对ERα乙酰化水平的影响;利用泛素化修饰实验方法检测MOF过表达或敲减以及MOF突变质粒对ERα泛素化水平的影响。4、采用双荧光素酶报告基因实验探索MOF过表达或敲减对ERα介导的基因转录的调控作用;利用Real-time PCR和Western blot实验验证ERα下游靶基因是否受MOF调控;通过染色质免疫共沉淀实验（Ch IP）验证ERα与MOF是否共同招募到ERα靶基因的反应元件ERE上。5、利用克隆形成,细胞增值,迁移和侵袭实验探究MOF对肝细胞肝癌细胞系的生物学功能。6、利用小鼠皮下成瘤实验验证MOF与肝细胞肝癌增殖的影响。结果:1、本研究证实MOF表达越高,肝细胞肝癌临床患者的预后越好;MOF在肝细胞肝癌中的m RNA表达水平低于癌旁组织;临床标本的分化程度越高,MOF表达越高;MOF和ERα的表达在新鲜肝癌组织样本中是降低的,并且存在正相关关系。2、MOF与ERα在肝细胞肝癌细胞系中存在相互作用;MOF和ERα在细胞中存在共定位,主要共定位于细胞核;MOF过表达增加ERα的蛋白稳定性。3、MOF在K266,K268,K299位点乙酰化ERα;MOF乙酰转移酶抑制剂MG149抑制ERα蛋白稳定性;MOF过表达或敲减可以抑制或促进ERα泛素化水平。4、MOF上调ERα介导的基因转录调控;MOF上调ERα下游内源靶基因（SHP和SMAD7）的调控;ERα与MOF可以共同招募到ERα靶基因SMAD7的反应元件EREIII上。5、MOF抑制肝细胞肝癌细胞系的生长,迁移,侵袭和脂滴形成。6、MOF抑制肝细胞肝癌的体内增殖。结论:1、HCC组织中MOF低表达且与ERα存在正相关关系。2、MOF与ERα在细胞内存在相互作用,MOF稳定ERα蛋白但不影响ERα的m RNA水平。3、MOF通过在K266,268,299位点乙酰化ERα进而抑制ERα的多泛素化水平。4、MOF上调ERα介导的基因转录调控,上调内源ERα靶基因的m RNA和蛋白水平。5、MOF抑制肝细胞肝癌的细胞生长,部分依赖于ERα;MOF抑制肝细胞肝癌的细胞迁移和侵袭。6、MOF在体内抑制肝细胞肝癌的细胞生长。