酵素、胶原蛋白联合丙泊酚对CCL4致小鼠急性肝损伤的影响

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目的探讨酵素、胶原蛋白联合丙泊酚对CCL4(Carbon tetrachloride四氯化碳)诱导的小鼠急性肝损伤的影响。方法取昆明种小鼠90只随机分为空白组1、空白组2、模型组、药物对照(联苯双脂滴丸150mg/kg)组、丙泊酚组(50mg/kg)、单纯胶原蛋白(900mg/kg)组、单纯酵素(900mg/kg)组、胶原蛋白联合丙泊酚(900mg/kg+50mg/kg)组、酵素联合丙泊酚(900mg/kg+50mg/kg)组,共9组,每组小鼠10只,胶原蛋白以及酵素灌胃给药,连续14天,丙泊酚腹腔注射给药,第9天到第14天连续给药6天,空白组1灌胃等量生理盐水,空白组2腹腔注射等量脂肪乳。除空白组外其他各组于第14天末次给药后1小时腹腔注射10%CCL4 2mg/kg,24小时后眼球取血,试剂盒微板法检测小鼠血清ALT(Alanine aminotransferase谷丙转氨酶)、AST(Aspartatetransaminase谷草转氨酶)浓度,处死取肝脏组织,检测肝体重比值,HE染色观察其肝脏病理改变,用试剂盒TBA(ThibabituricAcid硫代巴比妥酸)法检测肝组织中MDA(Malondialdehyde丙二醛)活力,WST-1法检测肝组织中SOD(Superoxide Dismutase超氧化物歧化酶)活力。结果1.10%的CCL4 2mg/kg腹腔注射24h后,模型组小鼠血清中ALT、AST水平较空白组明显升高(P<0.05);与模型组比较,单纯给予酵素、胶原蛋白组AST、ALT水平降低(P<0.05),丙泊酚组的小鼠ALT、AST水平下降不明显;酵素联合连续多次应用丙泊酚的小鼠以及胶原蛋白联合连续多次应用丙泊酚的小鼠ALT、AST水平下降显著(P<0.01)。2.与空白组比较,模型组的肝组织匀浆中MDA活力明显上升而SOD活力显著下降;与模型组比较,单纯酵素、胶原蛋白组MDA的含量下降(P<0.05),SOD的含量上升(P<0.05),丙泊酚组肝脏匀浆中MDA含量轻度下降,SOD含量轻度升高,酵素联合连续多次应用丙泊酚组的小鼠以及胶原蛋白联合连续多次应用丙泊酚组的小鼠MDA含量下降显著(P<0.01),SOD含量上升显著(P<0.01)。3.药物对照组,酵素组、胶原蛋白组、酵素联合丙泊酚组的肝指数相比模型组有所下降,其中以药物对照组(p<0.01)的结果较其他组最为明显,单纯丙泊酚组与胶原蛋白联合连续多次应用丙泊酚组的肝指数较模型组略微下降。4.模型组的病理学检查可见肝细胞变性和坏死程度严重,并出现大量空泡;酵素联合丙泊酚组与胶原蛋白联合丙泊酚组的病理学检查肝细胞变性坏死症状较轻,虽与空白组有差距,但最为接近药物对照组。结论1.丙泊酚单独使用并没有明显的肝保护作用,也没有明显加重肝损伤的作用;2.酵素、胶原蛋白、酵素联合丙泊酚应用以及胶原蛋白联合丙泊酚应用均能降低CCL4对小鼠的肝损伤作用,其作用机制可能与提高机体抗氧化能力,降低机体炎症反应有关。
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