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多粘类芽孢杆菌是一类能形成芽孢,可在逆境中良好生长的根际促生菌。CF05菌株是一株从天目山柳杉上分离获得的多粘类芽孢杆菌,具有潜在应用价值。为进一步明确其作用机制,本研究针对该菌株的生防促生机制开展研究,摸索发酵工艺,为该菌株作为生物农药开发提供理论基础。研究结果如下:1.分别采用对峙法和双层培养法,测定了CF05对番茄灰霉病菌、串珠镰刀病菌、棉花枯萎病菌等8种真菌和葡萄根癌病菌、白菜软腐病菌等4种细菌的拮抗活性,发现CF05对供试病原菌均具有明显拮抗活性。2.采用温室试验,测定了CF05芽孢悬浮液对番茄根结线虫病、番茄枯萎病铁皮石斛叶斑病的防治效果以及促生效果,结果发现对番茄根结线虫的防治效果达到64.4%,对番茄枯萎病的防治效果达到78.24%,对铁皮石斛细菌性叶斑病的防治效果达到63.6%。番茄和铁皮石斛植株均表现出明显促生效果,番茄鲜重提高了29.4%,干重提高38.4%。铁皮石斛鲜重增长74.6%,侧芽增加195.8%。3.采用抗性标记和跟踪检测的方法,测定了CF05在番茄根围的定殖能力,发现CF05能萌发并稳定定殖,25天后,定殖浓度达到8.0×103 CFU/g;采用高效液相色谱法,测定了CF05产吲哚乙酸的能力,发现CF05能产生IAA,其最高浓度达到5.35μg/ml;测定了番茄根部的PAL、PPO、POD和苯酚等植物诱导抗性关键酶活,发现CF05能明显提高其活性;测定了CF05对不同农药的敏感性,发现CF05对大部分常见农药具有良好的抵抗力,仅对部分杀菌剂敏感。完成了CF05的全基因组测序,获得了全基因组图谱。4.通过正交试验和单因子试验方法,摸索了培养基配方、pH值、接种量、温度对CF05产芽孢量的影响。获得了最佳发酵培养基:20.0g/L玉米粉,10.0g/L豆粕,10.0g/L鱼粉,5.0g/L磷酸氢二钾,0.5g/L Ca Cl2,0.5g/L Mg SO4和最佳发酵条件pH 7.0,接种量2%,温度30℃。进行了100 L中试发酵,制备了芽孢量为5×1010个/ml的微生物农药。