目的:1观察宣木瓜三个农家品种及光皮木瓜的解剖结构,为区分宣木瓜三个农家品种寻求依据;并为区分宣木瓜和光皮木瓜提供数码显微鉴别特征。2对宣木瓜果实横断面中主要活性成分进行组织化学定位的研究。3筛选不同型号大孔吸附树脂,为分离纯化宣木瓜醇提物中活性成分多酚、三萜类成分优选最佳树脂和最佳工艺参数。4考察木瓜醇提物活性成分在大孔树脂不同极性洗脱液中分布,为系统分离宣木瓜有效部位提供实验资料和科学依据。5通过本课题的研究,熟悉并掌握常规石蜡切片等制片技术,以及分离纯化中药材提取物、优化大孔树脂制备工艺参数的基本思路、方法及相应的实验操作。方法:1采用常规石蜡切片法对宣木瓜、光皮木瓜果实进行制片,通过显微观察比较石细胞自身形态、数量,石细胞群的分布位置、面积等,总结宣木瓜三个农家品种及伪品光皮木瓜解剖结构的特征。2根据显色反应等原理,对宣木瓜果实中的多酚类、三萜皂苷类成分进行组织化学定位,考察宣木瓜中可以表达其药材生物活性的成分的分布规律。3采用显色或沉淀反应检识大孔树脂不同浓度乙醇液洗脱液中的化学成分。4利用高效液相色谱法测定洗脱液中绿原酸和原儿茶酸以及齐墩果酸和熊果酸含量。5筛选分离纯化宣木瓜醇提物中三萜、多酚类成分的最佳树脂型号,并优化制备工艺中上样液浓度、上样液p H值、洗脱液体积、洗脱液流速等工艺参数。结果:1通过解剖结构观察,发现宣木瓜果实中部的横切面上自外向内依次有角质层、表皮细胞层、单宁细胞层、间断石细胞环带、薄壁细胞及其间的萼片、花瓣维管束、果心线附近的间断石细胞环带等部分。宣木瓜三个农家品种均存在两处间断石细胞环带,石细胞形态数量、石细胞群分布情况无较大差异;光皮木瓜中的石细胞形态与宣木瓜无异,但石细胞群多,呈无规则分散状态,与宣木瓜石细胞群呈间断、环带的分布情况明显不同。2两组组织化学定位的显色反应显示,多酚类成分的阳性反应在木瓜表皮内侧附近较为明显;宣木瓜中从其表皮到内部果心线附近均含有大量的三萜类成分,但三萜类成分在横切面上的颜色并未因组织结构不同而有明显差异。3由理化反应检识结果可知,大孔树脂分离的不同极性部位主要代表性成分相对明确,水洗,30%乙醇洗脱液含糖、酚类成分,可能含香豆素类,50%乙醇洗脱液含三萜类和酚类成分,95%乙醇洗脱液含三萜类成分;各洗脱液未检出生物碱类、蛋白质、鞣质及黄酮类成分。4明确了AB-8树脂可同时分离纯化多酚、三萜类成分;优选了AB-8树脂分离各部位的最佳工艺:上样液浓度为0.224mg?m L-1、上样液PH值为3、洗脱液体积为3BV、洗脱液流速为3m L?min-1。结论:1通过宣木瓜及光皮木瓜解剖结构中石细胞的分布情况等,可以作为数码鉴别宣木瓜和光皮木瓜的依据之一,但仅凭宣木瓜表皮内侧,花瓣、萼片维管束附近的石细胞群的分布情况及石细胞形态数量,难以对三个农家品种加以区分。2组织化学定位的结果表明,多酚类成分主要积累位置为木瓜果实中表皮部分,且明显多于果皮,三萜类成分在木瓜果实中各组织结构中的分布比较均匀。3宣木瓜药材75%乙醇提取物经AB-8大孔吸附树脂分离,可有效获得主要成分明确的三个极性部位:多糖类成分主要集中在水洗脱液中;多酚类成分主要集中在30%-50%乙醇洗脱液中;三萜类成分主要集中在95%乙醇洗脱液中。4 AB-8大孔树脂富集纯化宣木瓜醇提物多酚类、三萜类成分的工艺参数优化后进行中试试验,结果与课题组前期试验未进行工艺参数优化的数据相比,对酚酸的富集效果一般,但对三萜酸的富集效果较好,三组平行试验RSD值小于5%,说明优选的工艺稳定可行,具有很好的重现性,试验结果为宣木瓜醇提物的深入研究奠定了基础。