两亲性茯苓多糖纳米胶束的制备及其作为药物载体的研究

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茯苓是一种常见的廉价易得的中药材,其本身并无抗肿瘤活性。我们将茯苓多糖和不同碳链长(链长C4,C8,C12,C16)的溴代烷化剂经过简单的亲核取代反应后得到一系列烷基化茯苓多糖衍生物,然后为了提高体系的亲水性,将烷基化茯苓多糖进行羧甲基化反应,便可得到两亲性的茯苓多糖衍生物。该衍生物可以在水中自聚形成纳米胶束,我们期望它能作为一种载药系统,增加难溶性药物的水溶性,降低药物的毒副作用,并具有一定的缓释作用。本论文主要进行了以下工作:首先,我们将购买的茯苓多糖粗品按照碱提醇沉法进行纯化,纯化后的茯苓多糖与不同碳链长的溴代烷基化试剂反应后得到烷基化的茯苓多糖衍生物,继续与一氯醋酸进行羧甲基化反应,得到终产物。其次,以盐酸阿霉素(Doxorubicin,DOX)为模型药物制备药物溶液,并将其加入两亲性茯苓多糖水溶液中搅拌,将DOX以物理包载的方式包裹入茯茶多糖胶束,透析冻干后得到成品。之后我们对其进行了一系列的表征,包括红外可见光光谱(IR),烷基化和羧甲基化取代度实验,DLS测粒径表征,Zeta电位测试,通过透射电子显微镜测纳米胶束的形貌及粒径,以及用紫外分光光度法(UV-Vis)测试载药胶束的载药量和包封率。最后,我们探究了几种两亲性获苓多糖纳米胶束作为盐酸阿霉素的载体在体外的释药情况以及体外抗肿瘤活性,结果表明,茯苓多糖载药胶束对DOX有较强的缓释能力。我们选取脑胶质瘤细胞U87MG进行了抗肿瘤活性实验,发现四种载药胶束对该细胞的抑制率均有明显的浓度依赖性。其中,载药胶束C16对U87MG细胞的抑制率最高。而在细胞毒性实验中,并未发现茯苓多糖胶束对正常细胞具有明显毒性,证实了我们所合成的纳米胶束的安全性。
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