【摘 要】
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水稻的胚乳发育依赖于许多基因协同调节,转录因子在其中发挥了重要作用。我们的研究集中于一个水稻转录因子AGF1(Aberrant Grain Filling1),该基因突变后水稻结实率降低,原位杂交
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水稻的胚乳发育依赖于许多基因协同调节,转录因子在其中发挥了重要作用。我们的研究集中于一个水稻转录因子AGF1(Aberrant Grain Filling1),该基因突变后水稻结实率降低,原位杂交结果显示在胚乳细胞中表达,进一步研究显示在水稻胚乳发育的合胞期游离的胚乳核数目减少,在细胞化期,胚乳细胞数目也减少,后期胚乳细胞内复制也受到抑制,淀粉粒结构异常。 定量PCR结果显示agf1种子中细胞周期抑制家族基因KRPs表达上调,EMSA结果显示AGF1可以在体外结合KRP1启动子,双荧光试验也证实AGF1可以抑制KRP1启动子活性,这说明AGF1可以负调KRP1的表达水平。而且,流式细胞结果显示在胚乳发育早期(开花后3天),agf1胚乳细胞分裂活性受到抑制,G2期细胞比例升高,推测AGF1参与了细胞分裂过程中G2/M时期的转换,而在胚乳发育后期,12C和24C细胞的比例下降,说明agf1胚乳细胞的内复制也受到了抑制。agf1饱满的种子中淀粉结构异常,重量也有所下降,说明AGF1可能也参与了种子的灌浆过程。细胞周期重要组分CyclinD家族中很多基因在agf1中表达上调,这可能是一种反馈调节机制,以此来抵消KRPs表达上调对胚乳发育的影响。另外我们发现agf1成熟的种子在正常的2,4-D浓度(2 mg/L)的N6培养基上不能形成愈伤,增加2,4-D的浓度则可以诱导其长出愈伤,暗示AGF1突变后导致其对Auxin不敏感。 我们的研究表明AGF1通过调节KRP1的表达水平,既参与了水稻胚乳早期发育细胞周期的调控,也参与了水稻胚乳发育中晚期细胞内复制调节以及胚乳细胞中淀粉粒的形成。我们的研究结果为水稻胚乳发育以及种子灌浆提供了重要线索。
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