论文部分内容阅读
目的本试验通过对30例晚期恶性肿瘤患者进行自体DC-CIK细胞免疫治疗的临床试验,统计患者治疗前后外周血中各免疫细胞比例及生活质量评分量表等方面的数据变化,以阐述Dc-CIK治疗对晚期恶性肿瘤患者的临床疗效及免疫系统的影响。方法收集2014年1月1日至2015年3月1日于安徽省立医院肿瘤化疗科就诊,且经影像学及病理学检查明确诊断为晚期恶性肿瘤的患者共30例。其中男性20例,女性10例,平均年龄63.27±11.27岁,病理类型为肾透明细胞癌10例(33.3%),恶性黑色素瘤10例(33.3%),胃癌(腺癌)2例(6%),非小细胞肺癌2例(6%),结直肠腺癌2例(6%),卵巢癌2例(6%),输尿管癌1例(3%),子宫内膜癌1例(3%),多伴有不同器官的转移病灶,以上患者均接受两周期DC-CIK细胞免疫治疗。分离患者外周血单个核细胞,用密度梯度离心法提取淋巴细胞,充分洗涤,加入培养液后将其混悬于8张6孔培养板,置于37.5℃、5%C02培养箱中培养2小时,使悬浮细胞与疏松贴壁细胞分离,悬浮细胞使用含一定比例的CD3单克隆抗体、IFN-γ、IL-2、患者自体灭活血清、灭活小牛血清、庆大霉素的BTN无血清培养液诱导分化为CIK细胞,贴壁细胞用GM-CSF、IL-4、 TNF-a按一定比例依次诱导分化为DC细胞,在37.5℃、5%CO2培养箱中培养,定期观察细胞长势并及时补充培养液和细胞因子,细胞培养成熟后,经细菌、真菌、支原体检测为阴性,且台盼蓝染色活细胞>95%时,采集DC-CIK细胞,生理盐水洗涤3次,加入含患者自体灭活血清的生理盐水中,以细胞数为(1-3)x109/次静脉回输。使用流式细胞仪对患者回输前后外周血各免疫细胞比例进行检测,使用EORTC-QLQ评分量表评估患者回输前后生活质量各方面变化,同时观察患者细胞回输后的不良反应。结果患者进行DC-CIK细胞治疗后,评效为CR的人数为0例,PR的人数为0例,SD的人数为11例(36.67%),PD的人数为19例(63.33%),故ORR为0.00%,DCR约占36.67%。治疗后患者外周血中CD3+CD4+T细胞、CD3-CD16+CD56+NK细胞、CD3+CD56+细胞比例较治疗前升高,但CD3+CD8+T细胞比例较前下降,故CD3+CD4+/CD3+CD8+较前升高,CD3-CD19+细胞、CD3+CD56-细胞、CD8+CD3-CD19+B细胞比例无明显变化。将患者治疗前后QOL评分进行汇总后统计分析,可以看出治疗后患者生活质量在角色／认知／社会功能、总健康状况、恶心呕吐、气促、失眠、便秘、腹泻等方面有所改善,差异有统计学意义,而DC-CIK治疗后出现的不良反应主要为体温一过性升高、过敏、失眠等等,经临床对症处理后好转。结论DC-CIK治疗系自体免疫细胞体外诱导成熟,回输不良反应小、安全性高,可改善晚期恶性肿瘤患者免疫功能和生活质量,在临床治疗中有一定疗效,可作为放化疗失败患者的临床辅助治疗选择之一。