【摘 要】
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本文以侧孢短芽孢杆菌S-12-86海洋溶菌酶发酵液经离心超滤、CMSepharoseFastFlow阳离子交换柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析纯化得到电泳纯的海洋溶菌酶,其中阳离子交换柱层
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本文以侧孢短芽孢杆菌S-12-86海洋溶菌酶发酵液经离心超滤、CMSepharoseFastFlow阳离子交换柱层析和SephadexG-100凝胶柱层析纯化得到电泳纯的海洋溶菌酶,其中阳离子交换柱层析纯化效果最为明显,去除了大部分杂蛋白。海洋溶菌酶发酵液经纯化最后比活达到3279.5U/mg,纯化倍数为34.7,活力回收为24.1%。海洋溶菌酶对实验菌株的生长繁殖和代谢均有影响,抑制作用主要发生在指数期初期。海洋溶菌酶作用后大肠埃希氏菌的细胞质固缩,导致质壁分离,部分细胞壁缺失,细胞膜破裂,菌体变形,有些细胞质解体出现空腔;金黄色葡萄球菌细胞质不均匀,固缩较严重,中间有颜色较深成团物质出现,细胞壁变薄,有些细胞壁模糊不清,存在质壁分离现象,但未出现和大肠埃希氏菌类似的明显空腔。海洋溶菌酶对细菌的作用是一个复杂的过程,最终效果可能是作用于多个部位产生效果的叠加。海洋溶菌酶与蛋清溶菌酶及其它动植物来源溶菌酶和其它微生物来源的溶菌酶相比具有独特的优势,最适作用温度较低,稳定性好,溶菌谱广泛,对革兰氏阳性、革兰氏阴性菌和真菌均有不同程度的抑制作用,尤其是对多种致病菌有较强的作用。通过大鼠阴道混合感染金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌的动物模型,观察了海洋溶菌酶对细菌性阴道炎的治疗效果。大剂量(10mg/kg)、中剂量(5mg/kg)及小剂量(2.5mg/kg)对大鼠阴道金黄色葡萄球菌和大肠埃希氏菌混合引起的细菌性阴道炎均能达到不同程度的转阴,治疗作用明显,治愈程度分别为92.9%、82.1%和64.3%,且有一定的量-效依赖性。
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