检测甲胎蛋白用新型生物传感器的制备和表征

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在怀孕的后期,对母体中的α-甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)的检测可以在早期发现婴儿的脑和脊柱发育缺陷。正常的成人体内,异常的甲胎蛋白浓度常常意味着一些恶性疾病,比如前列腺癌及肝癌等。酶联免疫吸附(enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)是AFP检测的传统方法,但是这种方法操作繁琐、时间长,而且涉及到许多昂贵的生化试剂。近年来,生物传感器在医疗、生物和环境等领域取得了显著的进展。具有特异性识别能力的生物成分,和各种转换器相结合,形成了当前快速发展的生物传感器领域。电化学免疫检测方法具有安全、经济、灵敏度高,操作简单方便等特点,它在近年来吸引了人们的研究兴趣。 为此,本论文分别应用有机化合物普鲁士兰、导电高分子聚苯胺和注氧隔离技术获得的硅材料制备了三种电化学免疫生物传感器,实现AFP的快速检测。 首先,利用普鲁士兰制备电化学免疫传感器。结合一步三明治ELISA方法和一次性使用的丝网印刷电极技术,实现血液中AFP浓度的快速检测。普鲁士兰修饰电极,具有优越的过氧化氢的催化性能,可以在较低的电压下检测标记抗体的葡萄糖氧化酶反应生成的过氧化氢,降低了溶液中其他易氧化物质的干扰。利用流动进样分析技术,整个分析过程可以在30分钟内完成,而传统方法大概需要2小时。检测范围是5到500 ng/ml,符合临床检验适用范围。 聚苯胺和硅材料进一步用于制备免标记的免疫生物传感器,并用于AFP的检测。利用循环伏安方法将苯胺聚合到丝网印刷碳电极的表面并实现单克隆抗体在聚苯胺膜表面的固定。通过扫描电镜(Scanning electron microscopy,SEM),傅里叶红外光谱(Fourier infrared spectroscopy,FTIR)以及光电子能谱
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