目的:支气管哮喘(简称哮喘)是一种常见的异质性慢性气道炎症性疾病,其发病机制至今不清楚。随着目前全球支气管哮喘患者的不断增加,研究者们对哮喘发病机制的研究也越来越深入。众所周知,目前哮喘发病机制的研究方向主要与气道免疫炎症反应、气道高反应性及气道重塑有关。其中气道重塑增加了哮喘的严重程度,这些结构变化包括由于细胞脱落,杯状细胞增生,纤毛细胞破坏和气道上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal Transition,EMT)而引起的上皮完整性丧失。已知,气道重塑是重症哮喘显示出类固醇抵抗的原因之一,其中EMT起着重要作用。高迁移率族蛋白1(High Mobility Group Box 1,HMGB1)是一种广泛存在且高度保守的非组蛋白染色体结合蛋白,也是一种促炎介质。晚期糖基化终产物受体(Receptor for advanced glycationend products,RAGE)是涉及多种慢性炎症状态的多配体模式识别受体,它也是HMGB1的重要作用受体,介导HMGB1参与各种免疫炎症反应。目前HMGB1/RAGE信号通路已被证实参与诸多慢性气道疾病的发病过程,其中与哮喘患者气道炎症的发病机制密切相关,但在哮喘气道EMT中的作用尚未见研究报道。大量研究发现Th17细胞可加重哮喘患者的气道炎症、气道高反应性和气道重塑的过程,IL-17是Th17细胞的特征性效应细胞因子,深入了解Th17/IL-17信号在气道重塑及激素抵抗型哮喘中的作用对研究此类哮喘的防治至关重要。有研究指出HMGB1可能参与调节Th2和Th17的极化,并且HMGB1与Th17细胞的分化调节和分泌功能密切相关。但Th17/IL-17信号是否参与HMGB1/RAGE信号调控过程及涉及气道EMT之间的关系尚未有研究报道。因此,本实验首次研究HMGB1/RAGE信号调控Th17/IL-17信号及其在支气管上皮-间质转化中的作用。方法:通过获取野生型C57小鼠来源的CD4~+T淋巴细胞和经过转染处理沉默RAGE的CD4~+T细胞分别进行分组实验干预,体外观察HMGB1/RAGE信号调控Th17/IL-17的分化及其功能表达。再通过利用野生型小鼠来源的支气管上皮细胞建立正常的EMT细胞模型和经过转染处理沉默RAGE(sh-RAGE)的EMT细胞模型,分别进行干预分组,观察HMGB1/RAGE信号与支气管EMT间的关系。进一步将两种细胞按实验分组与Th17细胞共培养72h,以及与IL-17细胞因子刺激培养72h,体外观察Th17/IL-17信号在支气管EMT中的调节作用。结果:体外实验发现,HMGB1/RAGE信号可以促进Th17细胞的分化成熟并促进IL-17细胞的分泌,且具有浓度依赖性(p<0.05)。在小鼠支气管上皮细胞的EMT模型干预实验中,HMGB1/RAGE信号可以促进支气管EMT的发生发展;且与Th17共培养或者加入IL-17因子可以协同增强HMGB1/RAGE信号调控促进支气管EMT的过程(p<0.05)。当沉默RAGE时,会影响HMGB1的信号转导进而减弱对支气管EMT的调控程度(p<0.05)。结论:在体外,HMGB1/RAGE信号可通过促进Th17细胞的分化以和提高IL-17的分泌水平,协同增强支气管上皮细胞间质转化过程。结合我们既往的前期动物实验结果,推测这可能是HMGB1信号参与哮喘气道重塑的机制之一。