Lactobacillus casei Zhang适应阿莫西林环境分子机制的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:seasonlao
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Lactobacillus casei Zhang(L.casei Zhang)是从内蒙古锡林郭勒牧民家的传统发酵酸马乳中筛选出的一株性状优良的益生菌。在酸和胆盐等环境胁迫存在时,其具有较好的适应和抵抗能力。阿莫西林常常被用在临床上治疗细菌感染等疾病,对益生菌来说,它也成为一种新的胁迫压力。本研究以进化菌株L.casei Zhang-A-600为研究对象,首先对进化菌株L.casei Zhang-A-600和亲本菌株L.casei Zhang生长特性进行了研究,然后利用基于iTRAQ的蛋白质组学分析技术结合cre-loxP基因敲除技术来探究L.casei Zhang适应阿莫西林环境的分子机制。结果如下:(1)生长特性结果表明:L.casei Zhang-A-600的生长趋势与亲本菌株L.casei Zhang不同,活菌数和OD600nm的结果显示其生长速率远大于亲本菌株。(2)蛋白质组学结果表明:与亲本菌株相比,L.casei Zhang-A-600共有72个蛋白差异表达,其中38个蛋白显著上调控(差异倍数>2倍,P<0.05),34个蛋白显著下调控(差异倍数<-2倍,P<0.05)。通过KEGG和COG对其进行注释和功能分类,发现变化显著的差异蛋白主要是应激蛋白、碳水化合物和氨基酸的转运和代谢相关蛋白。(3)基因敲除结果表明:突变株L.casei Zhang-A-600-Δ0458和L.casei Zhang-A-600-Δ0521 与野生型菌株 L.casei Zhang-A-600 的 OD600nm值存在显著差异,表明这两个基因在L.casei Zhang适应阿莫西林环境中可能发挥作用。蛋白质组学技术是研究益生菌抗逆机制的有力工具,本研究一方面可为抗逆益生菌的筛选奠定坚实的理论基础;另一方面也可为益生菌工业化生产工艺的优化改进提供必要的理论指导。
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