目的基质金属蛋白酶与肿瘤生长、组织重塑、组织浸润和转移密切相关,可以指导科学家不断调整癌症治疗方向。因此,发展能对生物体内基质金属蛋白酶进行实时追踪检测的方法,可以极大推动基质金属蛋白酶相关的生理病理学机制研究,具有重要意义。基于基质金属蛋白酶中锌离子活性中心的结构特点,我们设计了一种小分子荧光探针,可直观地用于其定量检测和原位示踪。方法以8-羟基喹啉氮氧类衍生物作为小分子化合物探针,通过络合反应能够高选择性识别Zn²⁺为活性中心的基质金属蛋白酶。以MMP-2/9为代表,通过激光共聚焦荧光显微镜和免疫荧光技术,直观地显示活细胞中探针与MMP-2/9的结合情况;通过荧光分光光度计检测结合后荧光增强的倍数来确定MMP-2/9的含量。通过探针标记与免疫荧光共定位技术定性验证标记目标蛋白的准确性。结果及结论小分子探针能在活细胞中原位示踪基质金属蛋白酶,并且能在体外定量检测基质金属蛋白酶。