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藻蓝蛋白（phycocyanin PC）是藻胆蛋白的重要组分,主要存在于蓝藻、红藻、隐藻和少数一些甲藻中,是这些藻类进行光合作用的捕光色素之一。根据来源不同,一般分为C-藻蓝蛋白（C-PC）和R-藻蓝蛋白（R-PC）两种。藻蓝蛋白由α和β亚基组成,在天然条件下,大多数以（αβ）3或（αβ）6等杂聚体形式存在。研究表明,藻蓝蛋白具有众多医疗保健功能,比如抗炎症、抗氧化、清除自由基等,并具有一定的抗肿瘤功效。本文从钝顶螺旋藻中大量提取C-PC,研究了C-PC在体外对肺腺癌SPC-A1细胞的杀伤作用,初步探讨了C-PC的体外抗肿瘤作用机制;首次从C-PC中分离纯化到了具有完整荧光活性的α和β亚基,并对分子量更小,更适于成为药物的两个亚基进行了体外抗肿瘤试验。为C-PC及其α、β亚基能否成为新一代抗肿瘤药物建定了一定的理论基础。 本实验以新鲜钝顶螺旋藻为实验材料,建立起一套高效,简便的藻蓝蛋白分离纯化工艺,得到了最高纯度在4.5以上的藻蓝蛋白纯品,通过反复摸索和试验,运用CM-sepharose离子交换层析法从制备的新鲜藻蓝蛋白纯品中分离得到α和β亚基,并成功对两个亚基进行复性。经SDS-PAGE电泳、紫外/可见分光光度计及荧光分光光度计检测鉴定,分离得到的α和β亚基具有特异的光谱学性质和荧光活性,跟有关文献报道一致。 C-PC、α和β亚基的体外细胞毒性分析显示,三者对SPC—A1细胞的生长均有一定的抑制作用。在相同摩尔浓度下,β亚基具有对SPC-A1细胞最强的杀伤功效,并有良好的时间和剂量关系,提示其具有成为抗肿瘤药物的良好潜力。 研究还显示,较高浓度（≥40μM）的C-PC也可在体外显著抑制肺腺癌SPC-A1细胞的生长,并具良好的时间剂量关系。细胞核Hochest染色和DNA片断化检测表明,诱导细胞凋亡是C-PC杀伤肺腺癌SPC-A1细胞的主要途径,可能是C-PC体外抗肿瘤的主要作用机理。