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苦瓜皂苷和多糖的降血糖作用已有一些研究,但其降血糖作用是否存在协同作用尚未见报道。为此,本研究以苦瓜多糖和皂苷含量高的“碧绿2号”苦瓜品种为原料,建立其多糖和皂苷活性成分连续提取工艺,评价其协同辅助降血糖效果,并从糖脂代谢、抗氧化、胰岛保护作用和对小肠粘膜α—葡萄糖苷酶的影响等方面探讨其协同辅助降血糖作用机制,旨在为开发利用苦瓜资源提供新的参考依据。主要研究内容与结果如下:
1.苦瓜多糖和皂苷的连续提取工艺优化建立超声—微波法连续提取苦瓜中多糖和皂苷的优化工艺,结果表明:以苦瓜干为原料,将其粉碎过200目后,以75%(V/V)乙醇为提取溶剂,料液比1:18,超声—微波协同萃取(50W,20kHz)16min,苦瓜皂苷的提取率达2.51%。提取皂苷后的残渣,继续以水为提取剂,在料液比1:35,pH8.0,时间23min,温度84℃工艺条件下,苦瓜多糖的提取率达12.86%。
2.苦瓜多糖和皂苷提取物对糖尿病小鼠的协同降血糖作用评价研究苦瓜皂苷、多糖提取物对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型DM小鼠的协同降血糖作用及其体征变化的影响。结果表明,苦瓜皂苷、多糖混合物均显示一定的降血糖作用。尤其多糖皂苷交互高剂量组(300mg/kg·bw)较皂苷低剂量(150mg/kg·bw)、皂苷高剂量(300mg/kg·bw)、多糖低剂量(150mg/kg·bw)、多糖高剂量组(300mg/kg·bw)及多糖皂苷交互低剂量组(150mg/kg·bw)显著降低DM小鼠血糖水平(P<0.05),分别达19.7%、12.3%、19.6%、11.1%、9.1%。另多糖皂苷交互高剂量组(300mg/kg·bw)小鼠体征较DM模型组小鼠显著改善(P<0.05)。
3.苦瓜多糖和皂苷提取物对糖尿病小鼠糖脂代谢的协同影响从灌胃后DM小鼠糖耐量实验(OGTT)、肝糖原含量、己糖激酶活力和血脂水平变化等方面探讨苦瓜多糖和皂苷提取物对DM小鼠降血糖作用机制。结果表明:皂苷低剂量、皂苷高剂量、多糖低剂量、交互低剂量组及交互高剂量组小鼠在以上指标中较DM模型组小鼠均表现出一定的修复保护作用。尤其交互高剂量组在OGTT试验中,较皂苷低剂量、皂苷高剂量、多糖低剂量、多糖高剂量及交互低剂量组小鼠显著减小曲线下面积(P<0.05),分别达6.5%、3.8%、10.0%、3.9%和4.1%。皂苷、多糖组小鼠总胆固醇(TC)水平呈显著的量效关系,高剂量均显著优于低剂量组(P<0.05)分别达14.3、13.0%,交互低高剂量组小鼠之间TC水平虽无显著差异(P>0.05),但交互高剂量组小鼠TC水平显著低于多糖高剂量和皂苷高剂量组小鼠,分别达3.2%、23.0%。
4.苦瓜多糖和皂苷提取物对糖尿病小鼠的协同抗氧化和胰岛素保护作用从灌胃后糖尿病小鼠肝组织抗氧化剂水平、C—肽分泌量及胰腺组织病理观察等角度探讨苦瓜多糖和皂苷提取物对糖尿病小鼠降血糖作用机制。结果表明:交互高剂量组小鼠肝组织抗氧化剂水平、C—肽分泌量及胰腺细胞形态均优于或显著优于其余DM小鼠(P<0.05),较皂苷低剂量、皂苷高剂量、多糖低剂量、交互低剂量组小鼠提高过氧化氢酶水平(分别达11.1%、6.7%、24.8%、4.3%和16.0%)、超氧化物歧化酶水平(分别达30.1%、14.7%、15.6%、3.7%和17.7%)、还原型谷胱甘肽水平(分别达18.6%、10.3%、25.1%、14.0%和14.0%)及C—肽分泌量(分别达39.8%、5.4%、54.3%、48.7%和24.1%),降低丙二醛水平(分别达26.1、16.8、12.2、3.0和8.2%)。并且交互高剂量组小鼠内分泌细胞形态接近正常组,边界较清楚,细胞排列较整齐。
5.苦瓜多糖和皂苷提取物对糖尿病小鼠小肠粘膜α—葡萄糖苷酶的协同影响从小鼠小肠粘膜α—葡萄糖苷酶(蔗糖酶、麦芽糖酶和乳糖酶等)角度探讨苦瓜多糖和皂苷提取物对糖尿病小鼠降血糖作用机制。结果表明:交互高剂量组小鼠小肠蔗糖酶和麦芽糖酶酶活力水平显著低于皂苷低剂量、皂苷高剂量、多糖低剂量、交互低剂量组小鼠(P<0.05),其中降低小鼠小肠蔗糖酶活力分别达35.8%、20.2%、27.5%、24.2%和31.2%,降低小鼠小肠麦芽糖酶酶活力分别达8.6%、6.5%、16.9%、13.6%和16.5%。