目的研究Nrf2基因敲除对C57BL/6J小鼠放射性肠损伤的作用,并初步阐明Nrf2和NF-κB在放射性肠损伤中的作用机制。方法本研究采用13 Gy 137Cs γ射线腹部照射野生型和Nrf2基因敲除型C57BL/6J小鼠,建立放射性肠损伤模型;观察小鼠照射后30天存活率,并记录体重变化;测定小鼠的脾脏和胸腺等免疫器官指数和外周血细胞数量;通过碱性“彗星”实验检测外周血淋巴细胞DNA断裂损伤程度;通过HE染色和TUNEL染色免疫荧光实验检测小肠上皮完整性;采用免疫组织化学实验检测小肠组织Lgr5+干细胞及其子细胞的数量;采用免疫组织化学实验、蛋白免疫印迹实验和实时定量PCR法检测小肠组织部位NF-κBp65在细胞核内的磷酸化水平和NF-κB下游靶基因的表达水平。结果(1)存活率:与野生型小鼠相比,Nrf2基因敲除型小鼠腹部照射后30天存活率升高,全身照射后30天存活率降低。(2)免疫功能:腹部照射后Nrf2基因敲除型小鼠的胸腺指数和外周血淋巴细胞数高于野生型小鼠;Nrf2基因敲除型小鼠的外周血淋巴细胞DNA损伤程度轻于野生型小鼠。(3)小肠组织肠上皮完整性:腹部照射后野生型小鼠小肠组织隐窝数目减少,隐窝深度变浅,绒毛萎缩、钝化,而Nrf2基因敲除型小鼠小肠组织隐窝-绒毛结构损伤较轻。Nrf2基因敲除型小鼠小肠组织细胞凋亡数量明显低于野生型小鼠。(4)小肠组织的增殖分化能力:腹部照射后Nrf2基因敲除型小鼠小肠组织中Lgr5+干细胞及其增殖分化的子细胞潘氏细胞、Ki67+增殖细胞和绒毛细胞数量较野生型小鼠多。(5)NF-κB信号通路:与野生型小鼠相比,Nrf2基因敲除型小鼠小肠隐窝细胞核中NF-κB p65磷酸化水平升高,NF-κB下游靶基因Bcl-2、u和XIAP的mRNA表达量增加。结论Nrf2基因敲除降低了由腹部照射引起的放射性肠损伤小鼠的死亡率,减轻了小鼠的免疫功能损伤和肠上皮完整性的损伤。Nrf2基因敲除减轻由腹部照射诱导的放射性肠损伤的机制是通过促进小肠干细胞的增殖分化能力,以及激活NF-κB信号通路来增强小肠组织的损伤修复。