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目的:卵巢癌是女性生殖系统中常见的恶性肿瘤之一。临床研究表明卵巢癌患者术后接受化疗治疗是必不可少的,而以铂类为基础的化疗方案被视为标准方案,在临床中广泛使用。尽管化疗药物不断更新,但患者5年生存率仍未得到有效提高,其主要原因是肿瘤细胞耐药。本研究旨在探讨稀土氯化镧增强卵巢癌顺铂耐药细胞的顺铂敏感性,并对其相关机制做初步研究,为顺铂耐药性卵巢癌患者的治疗提供新思路和理论依据。方法:1、MTT法检测不同浓度顺铂(0.01、0.1、1、10、100μg/mL)对COC1和COC1/DDP细胞的生长抑制率,并计算DDP的半数抑制浓度(IC50)及耐药指数(RI)。2、MTT法检测不同浓度氯化镧(0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0μmol/L)培养COC1和COC1/DDP细胞48h后的增殖抑制率;用上述浓度的氯化镧分别与相应的IC50浓度DDP联合培养COC1和COC1/DDP细胞48h,MTT法检测氯化镧对细胞的增殖抑制率。3、分别用0、0.5、1.5、4.0μmol/L氯化镧培养COC1和COC1/DDP细胞48h,用透射电子显微镜观察细胞的形态学变化。4、COC1和COC1/DDP细胞分别设为对照组、顺铂组、氯化镧组、氯化镧+顺铂组,用流式细胞仪检测不同实验组COC1和COC1/DDP细胞的凋亡率。5、COC1/DDP细胞设为对照组、顺铂组、氯化镧组、氯化镧+顺铂组,培养48h后用Western Blot法检测不同实验组细胞中ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl蛋白的表达情况。结果:1、顺铂对COC1和COC1/DDP细胞均有明显的生长抑制作用,并随着顺铂浓度的增加而增强,有明显的剂量依赖性。COC1细胞株的IC50为2.06μg/ml,COC1/DDP细胞株的IC50为23.08μg/ml,耐药指数为11.19倍。2、MTT法检测细胞增殖抑制率:COC1细胞组,氯化镧对细胞的增殖抑制率随浓度的增加而增强,当氯化镧浓度为1.5μmol/L及其以下时,药物对细胞的抑制率低,与对照组相比P>0.05,氯化镧浓度为1.5μmol/L以上时,药物对细细胞的抑制率较高,并随氯化镧浓度增高而提高,与对照组比较P<0.05;COC1+DDP细胞组,氯化镧浓度低于1.5μmol/L时,药物对细胞的抑制率仍低,与对照组比较P>0.05,但其抑制率随氯化镧浓度的升高而增强,当氯化镧浓度为1.5μmol/L及其以上时,药物对细胞的抑制率明显升高,与对照组比较P<0.05。COC1/DDP细胞中观察结果与COC1细胞类似。故认为1.5μmol/L氯化镧单药对卵巢癌细胞无明显毒副作用,而与顺铂联合使用可以明显增强细胞毒性作用,选此浓度为增敏效果最佳浓度,用于后续实验研究。3、透射电子显微镜下观察显示:0和0.5μmol/L氯化镧组,COC1和COC1/DDP细胞形态正常,核膜完整,细胞器和细胞核结构清晰,胞内无空泡,两组间差异不明显。1.5μmol/L氯化镧组两株细胞均出现微量皱缩,细胞状态较前2组状态稍差。4μmol/L氯化镧组细胞凋亡严重,出现凋亡小体。4、流式细胞术检测凋亡率:对照组、顺铂组、氯化镧组、氯化镧+顺铂组处理后COC1细胞的凋亡率分别为5.52±0.92%、25.40±4.38%、7.22±2.55%、27.54±4.03%;对照组、顺铂组、氯化镧组、氯化镧+顺铂组处理后COC1/DDP细胞的凋亡率分别为4.60±1.11%、18.24±2.81%、5.59±1.73%、29.12±5.38%。变化趋势与MTT法检测结果一致。5、Western Blot法检测结果示:ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl蛋白在对照组、氯化镧组、顺铂组、氯化镧+顺铂组中的表达均逐渐下调,呈下降趋势。与对照组相比,氯化镧组ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl 4种蛋白表达均下调,但无统计学差异(P>0.05);顺铂组和氯化镧+顺铂组中,ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl蛋白表达显著低于对照组,差异有显著性(P<0.01);氯化镧+顺铂组与顺铂组比较,4种蛋白表达均明显下调,差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论:1.5μmol/L的氯化镧对卵巢癌COC1和COC1/DDP细胞均无明显抑制作用,但与顺铂共培养可增强顺铂对卵巢癌COC1和COC1/DDP细胞的抑制增殖作用及促进凋亡作用。氯化镧可能通过调节ERCC1、Ki67、CDK6及c-Cbl的表达,从而提高卵巢癌耐顺铂细胞对顺铂的敏感性,但其具体调节机制还需更多研究。