【摘 要】
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小蓬竹作为贵州喀斯特山地适生性竹种,在IUCN红色名录中,被定为极危种,对喀斯特地区水源涵养、水土保持、养分平衡等生态功能的实现起着重要作用。本文以罗甸县小蓬竹根际土
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小蓬竹作为贵州喀斯特山地适生性竹种,在IUCN红色名录中,被定为极危种,对喀斯特地区水源涵养、水土保持、养分平衡等生态功能的实现起着重要作用。本文以罗甸县小蓬竹根际土壤为研究对象,采用稀释平板法,挑选菌落形态差异的菌株,分离纯化小蓬竹根际土壤细菌、真菌和放线菌,对其16S rDNA(细菌、放线菌)、ITS rDNA(真菌)序列进行分析构建系统发育树,研究根际土壤可培养微生物多样性。同时,对小蓬竹根际土壤相关理化性质进行了研究,为小蓬竹的保护以及喀斯特山地土壤微生物多样性研究,提供一定的理论依据和技术支撑。主要研究结果如下:(1)小蓬竹根际土壤酶研究发现,过氧化氢酶活性8.74mL KMnO4?g-1?min-1;蔗糖酶的活性表示为2.64mg?g-1?d-1;脲酶的活性为0.04mg NH3-N?g-1?d-1;蛋白酶的活性表示为0.10mg NH2-N?g-1?d-1;碱性磷酸酶的活性高于中性磷酸酶的活性,分别为7.97mg P2O5?g-1?d-1、6.11mg P2O5?g-1?d-1。(2)小蓬竹根际土壤微生物数量为细菌数量>放线菌数量>真菌数量。每克干土中所含细菌、真菌、放线菌的平均数量分别为8.32×107 cfu·g-1、2.32×106 cfu·g-1、9.19×105 cfu·g-1。(3)采用稀释平板法分离小蓬竹根际土壤微生物,共获得菌落表型差异的细菌41株、放线菌20株、真菌33株。16S rDNA有效序列进行BLAST显示,41株细菌可划分为26个分类单元、放线菌可划分为15个分类单元均为链霉菌属(Streptomyces);真菌的ITS rDNA有效序列分析,可划分为24个分类单元。仅有1株真菌BLAST比对相似度仅为75%,可能为新种或属,其余菌株相似性均≥97%。细菌和真菌的Shannon-Wiener多样性指数H分别为1.0679、2.2180,丰富度指数S分别为7、12,均匀度指数J分别为0.5488、0.8926,及优势度指数D分别为0.5217、0.1295。(4)小蓬竹根际土壤细菌、放线菌基于16S rDNA序列建立系统发育树表明,29株细菌属于厚壁菌门(Firmicutes)(70.73%)(按单元种类数计算百分比),11株属于变形菌门(Proteobacteria)(26.83%),1株属于拟杆菌门(Bacteroidetes)2.44%,其中芽孢杆菌属(Bacillus)占绝对优势;分离获得的20株放线菌均为链霉菌属。ITS rDNA系统发育树分析,小蓬竹根际土壤真菌类群子囊菌门类群(占真菌总菌株数的96.97%),青霉菌属(Penicillium)、木霉属(Trichoderma)、曲霉属(Aspergillus)占绝对优势,占总菌株数51.51%,只有1株真菌属于担子菌门的菌属(Perenniporia),占真菌总菌株数的3.03%。(5)小蓬竹根际土壤中微生物的总数较多,细菌的数量上占优势,真菌的多样性指数较高,放线菌仅为1个属但种类较多,总体上小蓬竹根际土壤中含有较为丰富的微生物多样性。
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