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肺癌是人类最为常见的恶性肿瘤之一,近几十年来发达国家和发展中国家的肺癌死亡率皆急剧上升,据2005年世界卫生组织报告,肺癌是男性最常见的恶性肿瘤,女性肺癌死亡率仅次于乳腺癌,位列第二。在我国,肺癌已位居我国肿瘤死因的首位,有关肺癌的病因及其发病机制成为当前医学领域研究热点[1-5]。肽基脯氨酰顺反异构酶(简称Pin1)是丝/苏氨酸磷酸化信号通路的重要分子,它能特异性地催化磷酸化的丝/苏-脯氨酸基序发生异构,改变底物蛋白的构象,调节底物蛋白的功能。研究显示,Pinl在多种肿瘤组织中过度表达,且其过度表达能激活多条致癌通路,被称为肿瘤发生的“催化分子”。该基因的遗传变异可能与人群肺癌的发生有关;本研究拟通过病例-对照研究探讨中国南方人群肺癌的主要危险因素,并深入研究Pin1基因启动子的遗传变异与肺癌发病的关联。第一部分肺癌的病例-对照研究目的探讨中国南方人群发生肺癌的危险因素,为肺癌病因研究提供线索,为制定肺癌预防控制策略和措施提供科学依据。方法采取病例-对照研究的方法,收集广州市部分医院2006～2009年新诊断的原发性肺癌病例808例,按性别、年龄1:1配对选取808例正常对照,用由91个项目组成的问卷调查病例和对照有关危险因素的暴露史,资料统一输入Excel数据库,用SAS软件进行单因素和多因素logistic回归分析,筛选近年来南方人群肺癌的危险因素,并与前期研究进行对比分析。结果经单因素分析发现,肺结核,慢性支气管炎,肿瘤家族史,医源性X线等19个暴露因素与肺癌发生有关,多因素logistic回归分析结果显示与肺癌有关的6个主要危险因素和2个保护因素,它们分别是:吸烟,OR及95%可信区间为2.49(1.86,3.35);被动吸烟来源于父母,OR为2.23(1.58,3.15); COPD病史,OR为1.50(1.04,2.16);肿瘤家族史,OR为1.77(1.20,2.60);职业接触金属类毒物(镍/镉/铬),OR为2.17(1.25,3.76);医源性X线暴露,OR为1.92(1.33,2.76)。保护因素为厨房安装油烟机/排气扇和经常食用蔬菜水果,OR分别为:0.46(0.32,0.67)和0.25(0.19,0.34)。结论引起肺癌发生的环境因素与前期研究基本一致,但其OR有所下降,提示肺癌发生与环境因素相关,应积极控制环境危险因素,以减少肺癌的发生。第二部分Pin1基因启动子的遗传变异与肺癌发生之间的关联目的分析Pin1基因启动子区的单核苷酸多态,探讨环境-基因两者之间的交互作用在肺癌发病机制中的作用,为筛选人群肺癌易感标志物提供基础。方法在前期病例-对照研究的基础上,提取808例病例组和808例对照组血液基因组DNA;核酸定量仪检测DNA浓度和纯度。参考Genebank的SNP数据库,选取MAF>5%的常见多态位点,从Pin1基因启动子区选出2个潜在性功能位点进行研究:-842G>C[rs2233678], -667C>T [ rs2233679]。采取PCR-RFLP方法检测基因型,选取部分标本经PCR-测序鉴定,验证PCR-RFLP的结果。结果经分析发现对照组人群中Pin1基因启动子-667C>T位点符合Handy-weinberg遗传平衡(P=0.73),而-842G>C位点不符合Handy-weinberg遗传平衡(P=0.02);-842G>C和-667C>T两个SNP位点之间存在较弱的连锁不平衡(LD)。Pin1-842G>C和-667C>T基因多态在病例与对照之间的分布存在显著差异。以-842GG基因型为参照,-842GC基因型罹患肺癌的危险性明显下降(adjusted OR=0.62;95% CI=0.45-0.85;P=0.003),-842CC基因型与肺癌危险性下降的关联为显著性临界值(adjusted OR=0.39;95%CI=0.14-1.12;P=0.079),该位点基因型与肺癌风险的相关性有显著的等位基因剂量-效应关系(Ptrend=0.0007)。-842C变异基因型(-842GC和-842CC)与肺癌的危险性下降有显著性关联(adjusted OR=0.60;95%CI=0.43-0.81;P=0.001)。以-667CC基因型为参照,-667TC基因型与肺癌危险性下降的关联为显著性临界值(adjusted OR=0.81;95%CI=0.64-1.03;P=0.083),-667TT基因型罹患肺癌的危险性明显下降(adjusted OR=0.61;95%CI= 0.44-0.83;P=0.002),该位点基因型与肺癌风险的关联性存在显著的等位基因剂量-效应关系(Ptrend=0.0017)。-667T变异基因型(-667TC和-667TT)患肺癌的危险性显著降低(adjusted OR=0.75;95%CI=0.60-0.94;P=0.013)。将两SNP等位基因变异频数(简称:变异数)进行二分类组合分析,结果表明,变异数>1的个体罹患肺癌的风险将减小37%( adjusted OR =0.63,95%CI=0.49-0.80;P=0.0002)。分层分析发现,在年龄、性别、吸烟、饮酒、BMI各亚组中,Pin1基因启动子的遗传变异均可降低人群发生肺癌的危险性,其OR皆<1.00。结论Pin1基因启动子区域-842C和-667C位点的遗传变异可显著降低中国南方人群罹患肺癌的危险性,这种保护作用在各年龄、性别、吸烟、饮酒、BMI的亚组中皆起作用。