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目的:1、通过比较肝癌患者与健康对照及分析不同BCLC分期肝癌患者之间上皮间质化(EMT)相关基因表达差异,揭示EMT在肝癌发生发展中的作用;2、体外研究芪术抗癌方是否对TGF-β 1诱导的EMT具有抑制作用,为其临床应用提供理论依据。方法:1、提取肝癌患者及健康对照组外周血单个核细胞(PBMC),高通量测序获得基因表达量,筛选EMT相关基因数据,两组间进行差异分析;肝癌组内根据BCLC分级比较EMT相关基因表达差异,采用Spareman探索临床生化、EMT各基因相互之间的相关性;2、体外TGF-β 1诱导HepG2细胞发生EMT,加入芪术抗癌方浸提液共培养,显微镜下观察细胞形态变化,划痕实验观察细胞迁移情况,Western blot检测EMT相关蛋白表达量。结果:1、肝癌组 TGFB1、CDH1、CDH2、CTNNB1、VIM、SNAI1、TWIST2、ZEB1、ZEB2 的表达量均高于健康对照组(均P<0.05);2、肝癌患者按BCLC分期分为0～B期和C/D期,两组间CDH2差异无统计学意义(P>0.05),VIM、SNAI1和ZEB1在C/D期组表达低于0～B期组,差异具有统计学意义(均P<0.05);3、Spearman相关分析中,GGT与TGFB1、CDH2、ZEB1相关系数分别为-0.401、-0.455、-0.450,呈负相关,有统计学意义(P<0.05);ALB与SNAI1相关系数为0.365,呈正相关,有统计学意义(P<0.05);SNAI1、ZEB1、ZEB2与间质表型基因CDH2、VIM、CTNNB1均存在正相关,有统计学意义(均P<0.01),其中ZEB2与VIM、CTNNB1的相关系数为0.979,0.940,ZEB1与CTNNB1的相关系数为0.923。4、芪术抗癌方可以抑制TGF-β 1诱导HepG2细胞EMT的形态变化,划痕试验显示可以减少细胞迁移,与TGF-β 1组相比有统计学意义(P<0.05),Western blot显示HepG2 细胞加入 TGF-β 1 后,E-cadherin 表达减少,N-cadherin、Vimentin、Fibronectin和Snail表达增加,其中Fibronectin与对照组性比差异具有统计学意义(P<0.05),加入芪术抗癌方后,E-cadherin表达增加,呈浓度依赖,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),N-cadherin、Vimentin、Snail 和 Fibronectin 表达减少,其中Vimentin、Fibronectin和Snail与TGF-β1组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1、肝癌患者中EMT程序相对激活,在C/D期患者中,间质表型标志物相对减少,呈现MET逆转;2、EMT-TFs在间质表型基因的表达中有重要作用,其中ZEB家族可能由Wnt/β-catenin通路调控;3、芪术抗癌方能抑制TGF-β1诱导的HepG2细胞EMT变化,减少迁移。