本实验所采用的Absidia sp. G8r菌株所产的人参皂苷葡萄糖苷酶可以比较高效的水解人参中含量较多的人参皂苷Rbl从而得到稀有的,高附加值的人参皂苷C-K,从实验的结果可以较为容易的看出该酶的水解专一性很高,有很好的实验价值,为此,我们实验中深入的对其进行了分子水平上的研究调取了人参皂苷葡萄糖苷酶基因的全序列。在Absidia sp. G8r菌的液体发酵培养研究中发现,人参皂苷葡萄糖苷酶在以人参浸出液为诱导物时,使用人参浸出液和麸皮浸出液做为液体培养基,并且它么的体积比为6：4时,产量较大,诱导效果较好。实验中采用液氮速冻研磨菌体辅助破壁的改进的Catrimox-14TM试剂盒方法提取Total RNA,根据测得的人参皂苷葡萄糖苷酶蛋白N端序列ATLDSWLSNEATVAR和测得的肽质谱数据登陆NCBI网站和Matrixscience网站的蛋白质数据库进行比对,查找同源性,并根据同源性设计简并引物。从Absidia sp.G8r菌株的Total RNA出发,应用RACE技术,快速扩增测序得到cDNA3’末端与cDNA5’末端的未知序列,利用扩增测序所得到的cDNA5’末端和cDNA3’末端的序列设计引物,进行二次RT-PCR扩增并测序得到GluGF基因的全序列。回收PCR产物测序,得到GluGF基因的序列全长为2149bp,其中5’UTR长度为82bp,3’UTR长度为114bp,人参皂苷葡萄糖苷酶(GluGF)的CDS区序列全长为1923bp其所编码的氨基酸序列的长度为640个氨基酸。