卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤,其发病率低于宫颈癌和子宫内膜癌,由于原发性卵巢癌发病隐匿,早期诊断困难,约80%患者就诊时已为晚期,其死亡率居首位。即使经过手术和化疗,约70%晚期患者仍会在短期内复发。因此,寻找新的药物或治疗手段来提高患者的存活率是目前卵巢癌研究的重点之一。目的:探索MELK在卵巢癌组织中的表达情况,以及靶向敲减MELK后对卵巢癌细胞增殖、迁移、凋亡、克隆能力、铂敏感性和DNA损伤修复通路的影响。方法:通过数据库分析MELK在卵巢癌和正常卵巢组织中的表达差异,使用蛋白印迹（Western Blot）实验检测MELK在不同卵巢癌细胞株中的表达情况,筛选高表达细胞株进行试验;使用siRNA介导的RNAi技术体外敲减MELK的表达,使用MELK抑制剂（OTSSP167）敲减卵巢癌细胞株中的MELK表达量;通过CCK-8实验、EdU实验检测不同处理后SKOV3和OVCAR8细胞的增殖能力的变化;使用平板克隆实验检测SKOV3和OVCAR8不同处理组细胞克隆形成能力的变化;使用Annexin V/7-AAD双染色法检测各组卵巢癌细胞的凋亡;通过流式细胞术检测MELK敲低后对细胞周期的影响:通过Transwell和划痕实验检测MELK敲低后卵巢癌细胞迁移能力的影响;通过CCK-8实验检测MELK敲低后对顺铂敏感性的影响;通过彗星实验检测MELK被敲低后对DNA损伤的影响;通过Western Blot检测MELK敲低后对细胞周期、细胞凋亡相关靶蛋白的影响及DNA损伤修复通路相关蛋白的影响。结果:1.MELK在多数卵巢癌细胞株高表达,选取在mRNA和蛋白水平均高表达MELK的SKOV3和OVCAR8细胞进行实验;2.CCK-8和EdU实验证明转染siRNA和使用MELK抑制剂后,对卵巢癌细胞的增殖有明显的抑制作用;3.平板克隆实验证明,转染siRNA和应用MELK抑制剂后,卵巢癌细胞的克隆形成能力明显降低;4.流式细胞术结果显示MELK被敲低后,可以介导G2/M期阻滞,Western Blot实验验证了 MELK敲低后Cyclin B1和CDC2的表达量较对照组明显降低,证明了 MELK敲低可通过G2/M期阻滞影响细胞增殖能力;5.Annexin V/7-AAD双染色法验证了MELK敲低后可以诱导细胞的早期凋亡,Western Blot实验证明了 MELK敲低后Bcl-2/Bax复合物比例较对照组升高,证明了 MELK敲低后能够促进卵巢癌细胞的凋亡;6.Transwell和划痕实验证明了 MELK敲低后卵巢癌细胞的迁移能力被抑制;7.CCK-8实验证明了 MELK被抑制后能够增加卵巢癌细胞对顺铂的敏感性;8.彗星实验证明了 MELK被抑制后能够诱导DNA损伤的发生,Western Blot实验发现MELK被敲低组γ-H2AX、ATR/CHK1通路蛋白磷酸化的表达量明显升高,验证了 MELK被抑制后能够对DNA损伤修复通路产生影响。结论:MELK在卵巢癌细胞中高表达,通过靶向抑制MELK可以通过介导G2/M期阻滞而抑制卵巢癌细胞的增殖、克隆能力,并且通过影响Bcl-2/Bax复合物的表达诱导细胞凋亡。靶向敲低MELK后能够降低卵巢癌细胞的迁移能力,并增强其对顺铂的敏感性,MELK抑制剂可诱导DNA损伤,证明其在DNA损伤修复通路中起到重要作用。