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[目的] 树突状细胞(dendritic cell,DC)是目前已知机体内功能最强的专职性抗原提呈细胞,其最大特点是能够显著刺激初始型T细胞(naive T cell)增殖,是机体免疫反应的始动者。为了研究如何制备能被DC更好利用的肿瘤抗原,观察放疗是否具有增强DC免疫治疗小鼠肾癌的抗肿瘤作用,我们建立了瘤内注射DC联合放疗治疗小鼠肾癌的动物模型,评价这种联合治疗方法的抗肿瘤效果并探讨其机理。 [方法] ①应用rmlL-4和rmGM-CSF联合培养健康BALB/c小鼠骨髓来源的DC 6日,流式细胞仪检测细胞表型。②采用Annexin-V-FITC/PI法流式细胞仪检测体外不同剂量X线照射后Renca细胞凋亡率。③0日右侧腋窝皮下接种48只小鼠,3.52×106Renca细胞/只,分为肿瘤组、单纯放疗组、单纯DC组和DC联合放疗组四组进行治疗。单纯放疗组小鼠于第14～18日,连续5日接受肿瘤局部放射治疗,7Gy 6脉伏电子线/次,单纯DC组小鼠于第13、18、21、24日分别四次在肿瘤部位直接注射未负载肿瘤抗原的DC,1×10~6细胞/只/次,DC联合放疗组小鼠实施全部上述治疗方案。于小鼠荷瘤第13、15、17、19、21、23、25、27、29日卡尺测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长速率曲线图。第29日处死小鼠,测量肿瘤重量及计算瘤重抑制率。④各组肿瘤组织常规石蜡包埋切片,HE染色测定死亡面积;采用PV免疫组织化学法检测突变型P53蛋白的表达和TNF-α蛋白的表达。⑤双抗体夹心酶联免疫吸附实验检测小鼠脾细胞IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10分泌水平。 [结果]①流式细胞仪结果显示获得了成熟DC。②在一定照射剂量范围内,Renca细胞的凋亡率随照射剂量的增加而升高。③与单纯治疗组相比,DC联合放疗组小鼠的肿瘤生长速度明显减慢,肿瘤重量明显减小,抑瘤率高达79.32%。④免疫组化结果显示,单纯放疗组和DC联合放疗组TNF-α蛋白表达增加,单纯放疗组突变型P53蛋白的表达降低。⑤与单纯治疗组相比,联合治疗组脾细胞分泌IL-2和IL-4的能力显著提高,与其它各组比较均有统计学差异;IFN-γ的分泌明显增高。