核心蛋白多糖对大鼠骨髓炎中骨骼肌纤维化的作用及其机制研究

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目的:创伤性骨髓炎是创伤骨科的常见病与多发病,具有花费高,治疗难度大,病程迁延不愈,并发症多等特点。往往由高能量损伤导致的开放性外伤,并伴有严重的软组织损伤。目前在多种方法治疗下虽然能去除感染骨,但是仍然难以解决损伤部位软组织的纤维化。术后肢体功能的丧失往往与周围软组织纤维化及关节僵硬密切相关。如何才能治疗骨髓炎后遗留的软组织过度纤维化逐渐引发临床医生重视。笔者通过病理学观察,Masson染色,免疫组织化学,以及免疫蛋白印记(Western Blot)等实验方法,观察核心蛋白多糖(Decorin,DCN)对大鼠骨髓炎中骨骼肌增生瘢痕组织中TGF-β1、phosphp-Smad3和I型胶原细胞因子表达的影响,探讨Decorin对大鼠骨髓炎中骨骼肌纤维化的作用及其机制。方法:本研究采用改良设计的大鼠钝挫伤造模法建立大鼠创伤性骨髓炎模型,将90只健康清洁级雄性(Wistar)大鼠,随机分成3组(每组30只):骨髓炎组A,PBS注射组B和Decorin干预组C。细菌浓度采用106CFU/ml,Decorin注射组于术后当天给予10ug/ml Decorin稀释液局部肌肉注射,以后每隔5 d注射一次,PBS注射组给予等计量的PBS局部注射,骨髓炎组不干预。术后1、2、4 w取组织,采用病理学观察,Masson染色,免疫组化和免疫蛋白印记法(Western blot)评价慢性骨髓炎中骨骼肌瘢痕化的程度。结果:1.(1)术后4 w,Masson染色显示C组胶原纤维排列有序,且明显少于A,B两组;A,B两组没有明显差异。(2)免疫组织化学染色显示,C组TGF-β1和I型胶原表达显著低于A,B两组;A,B两组没有明显差异。(3)Western blot显示,C组TGF-β1和I型胶原表达显著低于A,B两组,具有统计学差异(p<0.01);A组TGF-β1和I型胶原表达显著低于B组,没有明显差异(p>0.05)。2.C组与A组相比,通过HE染色观察发现,术后2 W及4 W组织纤维化程度明显减轻,Western blot结果显示TGF-β1、phosphp-Smad3和I型胶原蛋白水平显著降低,术后1 W未见明显差异。结论:1.Decorin能有效抑制创伤性骨髓炎所致的骨骼肌纤维化。2.Decorin抑制骨骼肌纤维化过程与PBS无关。3.Decorin抑制骨髓炎中骨骼肌纤维化与TGF-β-Smad信号通路有关。
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