【摘 要】
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目的输卵管积水对子宫内膜种植微环境的建立具有不良作用,但具体机制尚不清楚。子宫内膜蜕膜化是人类妊娠过程中的关键步骤,为胚胎植入母体及后续发育提供环境和营养支持。因此,本研究旨在探究输卵管积水对子宫内膜蜕膜化过程的影响及作用机制。方法收集30例仅因男性因素不孕女性的新鲜子宫内膜组织,设为正常组,分离人子宫内膜间质细胞后进行培养。经输卵管积水刺激2h后进行体外蜕膜化诱导,于第3天和第6天通过酶联免疫吸
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目的输卵管积水对子宫内膜种植微环境的建立具有不良作用,但具体机制尚不清楚。子宫内膜蜕膜化是人类妊娠过程中的关键步骤,为胚胎植入母体及后续发育提供环境和营养支持。因此,本研究旨在探究输卵管积水对子宫内膜蜕膜化过程的影响及作用机制。方法收集30例仅因男性因素不孕女性的新鲜子宫内膜组织,设为正常组,分离人子宫内膜间质细胞后进行培养。经输卵管积水刺激2h后进行体外蜕膜化诱导,于第3天和第6天通过酶联免疫吸附剂测定(ELISA)检测泌乳素(PRL)分泌情况,并收集第6天细胞,通过实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测PRL m RNA表达水平。收集11例输卵管积水患者子宫内膜组织,设为输卵管积水组。选取输卵管积水组和正常组各1例进行双向电泳和质谱分析,筛选差异表达蛋白。通过q RT-PCR验证输卵管积水组和正常组各10例子宫组织中差异表达基因AIDA m RNA表达情况。利用在体外诱导的人子宫内膜间质细胞蜕膜化模型,探究加入输卵管积水刺激后AIDA m RNA表达水平。通过蛋白质印迹法检测输卵管积水对蜕膜化的子宫内膜间质细胞中p-β-catenin和β-catenin表达情况。在第3天和第6天中,每个患者的输卵管积水刺激2h后均能够诱导蜕膜化的间质细胞PRL表达水平的降低。输卵管积水刺激后的第6天间质细胞中PRL m RNA表达水平均下降。检测两组差异表达蛋白,发现输卵管积水组中AIDA蛋白表达异常上调。扩大样本量后经q RT-PCR检测验证发现患有输卵管积水患者的子宫组织中AIDA转录水平异常升高至对照组的3倍左右。细胞实验结果显示,经输卵管积水处理的子宫内膜间质细胞中AIDA m RNA表达水平上升。此外,添加输卵管积水能抑制蜕膜化诱导后子宫内膜间质细胞中AIDA m RNA表达水平下调,同时使p-β-catenin与β-catenin的比值增大。结果结论逆流至宫腔中的输卵管积水阻碍子宫内膜蜕膜化过程,并导致子宫内膜组织中AIDA的异常上调,该过程可能与Wnt/β-catenin通路有关。
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