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目的:研究大鼠缺血心肌细胞PI3K/AKT信号通路关键蛋白AKT、p-AKT、GSK-3β、p-GSK-3β表达活化状态与Cx43、Kir2.1蛋白表达关系,探讨缺血心肌细胞PI3K/Akt信号传导通路参与miRNA-1介导的缺血性心律失常的调控机制,寻找缺血性心律失常的潜在防治靶点和可能措施。内容与方法:18只SD大鼠随机分组,分成假手术(Sham组)、LY294002抑制剂干预组(LY组)和心梗/溶剂组(DMSO组)三组,每组6只。(1)大鼠心梗模型建立,通过结扎大鼠冠脉左前降支建立大鼠心梗模型,监测心电活动、TTC法染色检测梗死面积。(2)制备大鼠心梗边缘区缺血心肌细胞上清液,Western blot方法检测各组心肌细胞关键蛋白AKT、p-AKT、GSK-3β、p-GSK-3β、CX43和Kir2.1表达水平。(3)荧光定量PCR检测各组心肌细胞GJA1/Connexi43、KCNJ2/Kir2.1相关mRNA的表达水平。(4)统计学方法分析,计量资料表示为均数±标准差(?x±s),进行正态性检验及方差齐性检验,两样本t检验,Satterthwaite近似t检验;计数资料进行四格表资料χ2检验;以p<0.05差异具有统计学意义。结果:DMSO组、LY组中各有一只大鼠实验过程中死亡,死亡率为16.7%。随着冠脉LAD结扎时间推移,可见ST-T波水平随时间推移持续抬高,在缺血20min左右达高峰之后相对恒定。Sham组可见偶发室早,未发现有室速发生。相对于Sham组,DMSO组和LY组室早和室速情况发生率更高(p<0.05)。与DMSO组相比,LY组室早和室速发生率更高(28±3.12vs36±5.23;5.1±1.52vs8.2±3.42,P<0.05)。心肌梗死面积DMSO组小于LY组(31.7±4.8%vs36.8±6.94%,P<0.05)。相较于对照组(Sham组)溶剂组(DMSO组)的P-GSK-3β、Cx43、Kir2.1和p-Akt表达水平显著降低(2.21±0.17vs1.82±0.15;1.79±0.12vs1,42±0.09;2.08±0.25vs1.68±0.14;2.02±0.30vs1.60±0.16,P<0.05),而未磷酸化的AKT、GSK-3β表达水平两组间无显著差别(0.90±0.08vs0.80±0.06;0.97±0.07vs0.90±0.08,P>0.1)。PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002预处理组(LY组)相较于对照组(Sham组)P-GSK-3β、Cx43、Kir2.1和p-Akt表达水平进一步降低的同时,非磷酸化的AKT、GSK-3β表达水平亦有所下降(0.60±0.06vs0.97±0.07;0.42±0.03vs0.75±0.05,P<0.01)。GJA1/Connexi43、KCNJ2/Kir2.1相关mRNA的表达水平DMSO组较Sham组间无显著差别(3.28±0.08vs3.35±0.21;2.81±0.15vs2.9±0.4,P>0.5)。而在LY组,GJA1/Connexi43、KCNJ2/Kir2.1相关mRNA的表达水平明显低于Sham组(1.71±0.06vs3.35±0.21;0.51±0.04vs2.9±0.4,P<0.01)结论:缺血的大鼠心肌细胞PI3k/AKT/GSK-3β信号通路呈相对抑制状态,表现为关键蛋白AKT、GSK-3β表达水平和磷酸化水平都降低,并伴随着心肌细胞Cx43、Kir2.1蛋白表达水平降低,但GJA1/Cx43、KCNJ2/Kir2.1相关mRNA水平并未降低。此外,在大鼠心梗模型中抑制PI3k/Akt信号通路加剧缺血的心肌损伤、扩大了心肌梗死范围、缺血性心律失常发生率增加。