我室研制、开发的重组双功能水蛭素RGD-Hirudins是一种双功能的水蛭素，既具有抗凝血酶的作用，又有阻断血小板聚集的作用。它属于基因工程的蛋白类药物，此类药物的临床应用与剂型有很大的关系。本课题在研究重组双功能水蛭素的剂型选择上，建立在两个最基本的前提上：1、抑制蛋白质药物的失活、降解；2、促进蛋白质分子进入血液循环。蛋白类药物的微球制剂其包封率、药物活性、含量、缓释释放的作用都比较好，而且由于其开发周期短，投入较少。 W／O／W微球制剂能通过水油相对蛋白的包裹，从而保护蛋白质。如果在口服情况下，微球中的重组双功能水蛭素在生物可降解材料的保护下，能稳定地通过胃酸环境的胃体到达小肠，在小肠的pH条件下，微球中的蛋白类药物缓慢地释放出来，进入血液循环，达到药物治疗的作用。另外，微球中含有的生物可降解材料又能促进蛋白质的吸收，再加上微球粒径小、稳定，在目前的缓控释制剂研究中，值得深入研究，并且颇有前景。 以溶剂挥发法和复乳溶剂挥发法制备微球的过程中，溶剂的组成、各相体积比以及总体积、聚合物浓度、稳定剂种类、搅拌速度、搅拌时间等因素都会影响微球的质量(即良好的包封率、适宜的释药模式和粒径分布、溶剂残留量少等)。在运用溶剂挥发法制备微球的过程中，运用不同的包裹法制得的微球包封率、收率，以及载药量有明显差别。 本课题主要研究：1、建立RGD-Hirudin微球制备工艺；2、建立缓释微球制剂中药物活性、含量的测定方法；3、分析微球制备工艺中的各个关键参数对微球质量的各个指标的影响情况。 我们选择聚乙烯醇(PVA)作为助乳剂，聚乳酸聚羟基乙酸(PLGA)作为微球的生物可降解载体，二氯甲烷作为有机溶剂，溶剂蒸发温度为室温，运用溶剂挥发法制备W／O／W的双乳微球制剂。在微球的制备工艺研究中，我们考察了内水相中水油比例对微球粒径以及收率的影H向，助乳剂PVA浓度对微球外观以及微球的包封率和收率的影响，超声次数对微球成球率以及药物活性的影响，挥发搅拌速度对微球的成球率以及外观的影响，不同粘度的PLGA对微球的外观以及分散度的影响，NaCl浓度对微球的包封率、收率以及载药量的影响等。 利用颗粒粒径系统(PSS)对所制备微球样品的分析得出，微球平均粒径81．38um，适合做进一步的体内研究。几批微球的载药量和收率都很高，分别为83．92％～96．3％和79．93～95．05％；包封率为23．95～65．13％。其中NaCl浓度、PVA浓度对微球包封率的影响比较明显。微球的稳定性试验表明，微球释放率稳定，并且释放的重组双功能水蛭素(RGD一Hirudin)活性稳定性保持良好，体外释放实验得出其具有缓慢释放的效果，为进一步做动物体内实验打下了基础。