高效液相色谱分析法是在经典柱色谱分析法的基础上发展起来的一种快速分离分析技术,因其具有适用范围广、选择范围宽、分离性能好、分析速度快、灵敏度高、结果精确、操作自动化程度高的特点被广泛应用于分离分析中药中的活性成分。荧光分析法以其灵敏度高、选择性好、检出限低、用样量少的优势而逐渐发展成为一种十分重要且有效的光谱化学分析手段。本文采用高效液相荧光检测器对中药五味子、香薷、茵陈中的有效成分进行了定性和定量分析。利用多发射色谱图的保留时间和激发、发射波长同时对色谱峰进行了归属,使定性更加真实、准确;利用多发射荧光色谱图可明显观察出溶剂峰和散射峰的特点,在选择流动相和检测波长时有效规避了其对色谱峰叠加的干扰,使定量分析更加精确,可靠;同时将高效液相色谱法的低检出限和荧光检测法的高灵敏度有机地结合起来,使得该方法对荧光成分的检测基本达到了ng·m L-1,甚至更低的水平。本文还通过传统的高效液相紫外检测法对中药中相关成分的含量进行了验证,充分揭示了高效液相荧光检测法高度的选择性、灵敏性和准确性,从而开启了对中药有效成分进行含量测定的新篇章。论文工作主要包括三部分:1、首次建立了同时测定中药五味子中原儿茶酸、五味子醇甲、安五脂素和五味子乙素的反相高效液相荧光检测的定性定量分析方法。采用等度洗脱的方法,发现了甲醇-水或乙腈-水两种流动相体系的不足,选择了甲醇-乙腈-水(50:25:25)为流动相,λex/λem=244/356nm的条件下,克服了以往文献中一次实验只能测定一种成分的缺点,在20min内分离了这四种成分,并同时对其进行了分析测定,简单快捷。该方法在其荧光最强且性质稳定的前提下确定了最佳的色谱条件,测得四种标准品的日内稳定性和精密度的RSD在0.25%~0.81%之间,回收率在95.0%~105.0%之间,准确度高;所得的线性范围更宽,灵敏度更髙,其中五味子醇甲、安五脂素和五味子乙素的检出限到了ng·m L-1的范围。所建立的方法应用于五味子市售药材和对照药材中四种标准品含量的测定,结果准确、可靠。2、建立了同时测定中药香薷中两种挥发油(麝香草酚和香荆芥酚)含量的反相高效液相荧光检测的定性定量分析方法。麝香草酚和香荆芥酚为同分异构体,性质相似,色谱保留属性差异很小。本实验采用等度洗脱的方法,选择了乙腈-p H=2.97冰乙酸水溶液(45:55)为流动相,λex/λem=276/312nm,流速为0.5 m L·min-1的条件下,克服了大多数文献中只能以二者总含量为指标的缺点,在30min内成功分离了两种成分,并同时对其进行了分析测定,简单可靠。该方法测得两种标准品的日内稳定性和精密度的RSD在0.15%~0.35%之间,所得的线性范围更宽,灵敏度髙,检出限均到了ng·m L-1的范围,回收率均在95.0%~105.0%之间,准确度更高。所建立的方法应用于香薷市售药材和对照药材中两种成分含量的测定,结果准确、可靠。3、首次建立了同时测定中药茵陈中三种香豆素(东莨菪内酯、滨蒿内酯、7-甲氧基香豆素)含量的反相高效液相荧光检测的定性定量分析方法。采用等度洗脱的方法,选择了甲醇-p H=2.20冰乙酸水溶液(55:45)为流动相,λex/λem=356 nm/428 nm为检测波长,流速为0.8 m L·min-1的条件下,克服了多数文献中以总香豆素含量为指标的缺点,在6min内成功分离了三种成分,并同时对其含量进行了准确测定,解决了茵陈中东莨菪内酯、滨蒿内酯因含量极低而无法测定的难题。该方法测得三种标准品的日内稳定性和精密度的RSD在0.5%~2.0%之间,准确度高,选择性良好,灵敏度高,检出限均达到ng·m L-1的范围,线性范围宽,回收率均在95.0%~105.0%之间。所建立的方法应用于茵陈市售药材和对照药材中三种香豆素含量的测定,方法简单、可靠。