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目的:观察异氟醚后处理对大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用,以及探讨TGF-β1和ERK5在其保护机制中的作用,为异氟醚抗缺血性脑损伤的基本分子机制提供新见解。方法:使用雄性SD大鼠(体重范围在50~100g),将其麻醉后取出完整海马组织并切片,制成离体脑片。然后将脑片随机做不同分组处理,包括正常对照组、损伤组、不同浓度梯度的异氟醚后处理组、DMSO组、TGF-β1和ERK5信号蛋白阻断剂组,以及阻断剂联合异氟醚后处理组。采用TTC染色法评价各组脑片损伤程度,采用碘化丙啶染色法检测海马CA1区神经细胞死亡程度,采用免疫荧光法检测大鼠海马脑片CA1区TGF-β1的表达情况,采用q RT-PCR法从基因层次测定Smad2、Smad3和ERK5 m RNA的表达,采用Western blot法从蛋白水平检测TGF-β1、Smad2/3和ERK5信号蛋白的表达与磷酸化水平。结果:与1.5%ISPOC组和4.5%ISPOC组相比,3.0%ISPOC组减轻脑片OGD损伤程度和神经细胞死亡程度最为显著,TGF-β1、p-Smad2/3和p-ERK蛋白表达明显增多(P<0.05)。与3.0%ISPOC组相比,给予TGF-β1阻断剂LY2157299、ERK5阻断剂XMD8-92后,脑片OGD损伤程度与CA1区神经细胞死亡程度显著升高(P<0.05)。免疫荧光结果显示,3.0%ISPOC组CA1区神经细胞质浆内可见明显TGF-β1表达,给予LY2157299、XMD8-92后均未见明显TGF-β1表达(P<0.05)。此外,给予LY2157299、XMD8-92后,Smad2、Smad3和ERK5 m RNA表达水平也均显著降低(P<0.05)。与3.0%ISPOC相比,给予阻断剂后相应信号蛋白表达明显降低;并且,给予LY2157299后,p-Smad2/3、p-ERK5表达降低;给予XMD8-92后,TGF-β1、p-Smad2/3表达也明显降低(P<0.05)。结论:(1)在本研究情况下,3%ISPOC对大鼠海马脑片OGD损伤具有明显神经保护作用。(2)TGF-β1/ERK5信号通路以交互对话的形式参与了异氟醚后处理的神经保护机制。