【摘 要】
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家蚕是一种能吐丝的经过家养驯化的鳞翅目昆虫,兼具重要的经济价值和学术价值。在昆虫中相对较好的研究基础以及相对简单的饲养条件,也使得家蚕被普遍接受为鳞翅目昆虫的模式生物。然而,与其他研究基础较好的模式生物比如果蝇相比,家蚕的研究仍然落后许多。其重要原因之一是用于家蚕基因功能研究的研究体系和研究手段还比较缺乏,这已经成为深入研究的一种限制。在众多有待完善或开发的研究手段中,可以进行外源基因的成体导入和
【机 构】
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中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）
【出 处】
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中国科学院大学(中国科学院上海生命科学研究院)
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家蚕是一种能吐丝的经过家养驯化的鳞翅目昆虫,兼具重要的经济价值和学术价值。在昆虫中相对较好的研究基础以及相对简单的饲养条件,也使得家蚕被普遍接受为鳞翅目昆虫的模式生物。然而,与其他研究基础较好的模式生物比如果蝇相比,家蚕的研究仍然落后许多。其重要原因之一是用于家蚕基因功能研究的研究体系和研究手段还比较缺乏,这已经成为深入研究的一种限制。在众多有待完善或开发的研究手段中,可以进行外源基因的成体导入和瞬时表达的基因载体系统是需要的。 本论文第一部分的前半部分展示了重组杆状病毒vAc?EGT 作为外源基因导入表达的载体应用于家蚕成体的可行性。以增强型绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein, EGFP）为报告基因,本部分工作证实,通过注射重组病毒vAc?EGT的出芽病毒（Budded virion, BV）到五龄起蚕血淋巴,外源基因能被病毒携带进入家蚕体内的多种组织细胞,实现瞬时高效的表达。vAc?EGT是从苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（Autographa californica nuclear polyhedrosis virus, AcNPV）基因组上敲除蜕皮激素UDP糖基转移酶（The ecdysteroid UDP-glucosyltransferase, EGT）基因得到的。EGT基因是AcNPV感染宿主的感染早期表达的非必需基因（Non-essential gene）,该基因表达产物能通过糖基化失活宿主昆虫苜蓿银纹夜蛾的蜕皮激素,从而推迟宿主幼虫蜕皮,延长幼虫期。已有研究表明,伴随高滴度的AcNPV病毒注射带来的EGT基因高表达使得家蚕幼虫不能完成变态发育,在蛹期死亡;而敲除了EGT基因的AcNPV注射后,家蚕龄期不变,变态发育正常完成。以EGT缺失的AcNPV病毒vAc?EGT为载体,EGFP报告基因由不同的家蚕启动子控制,在家蚕体内实现了不同类型的表达。
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