槟榔芋水溶性多糖的提取、抗氧化活性及对糖代谢的影响

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多糖是生物大分子的基本种类之一,近几十年来的研究表明,从一些植物中提取的多糖具有多种生理功能,如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、抗糖尿病、抗菌和抗疲劳等,同时对正常的细胞没有毒副损害。本论文以广西的槟榔芋为原料,提取分离其中的水溶性多糖,并从抗氧化和糖代谢两方面探究其体外活性,为其在功能性食品应用中提供一定的科学理论依据。主要的研究结果如下:本文采用热水浸提法提取槟榔芋中的水溶性多糖,响应面优化法确定最终的提取条件为料液比1:33,80℃提取0.9 h,离心后取上清液旋蒸浓缩,加入3.5倍体积无水乙醇过夜,收集沉淀,除蛋白、脱色、透析后经冷冻干燥得到槟榔芋水溶性多糖(TSP)。TSP中多糖含量为77.18±1.91(g/100g)。TSP的纯度测定表明,其组分为非均一多糖且分子量较大,其中最小的多糖分子量在104数量级。红外光谱分析结果表明TSP具有α构型吡喃糖的特征吸收峰。HPLC分析结果表明TSP由甘露糖(0.62%)、鼠李糖(0.61%)、半乳糖醛酸(3.72%)、葡萄糖(90.64%)、半乳糖(3.66%)、阿拉伯糖(0.74%)组成。扫描电镜图显示TSP的形貌特征以丝状和薄片状为主。TSP具有体外抗氧化活性:(1)TSP对DPPH、ABTS自由基具有清除能力,半最大效应浓度EC50分别为0.26 mg/mL、4.99 mg/mL;TSP对羟自由基和超氧阴离子自由基的产生具有抑制作用,其EC50分别为0.39 mg/mL、5.81 mg/mL;其中,TSP对羟自由基的抑制能力与Vc接近,对超氧阴离子自由基的抑制能力大约达到Vc的5%,对DPPH、ABTS自由基的清除作用为Vc的12%。(2)TSP样品能够螯合亚铁离子,间接发挥抗氧化和抗自由基的作用,当其浓度为5 mg/mL时,螯合能力达到82.79%。(3)TSP对自发和H2O2诱导的小鼠红细胞氧化溶血、小鼠内脏组织脂质过氧化具有不同程度的保护作用。TSP能够抑制α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的活性,其半数抑制浓度IC50分别为4.02 mg/mL和3.10 mg/mL。TSP对胆酸钠、牛胆酸钠、甘胆酸钠三种胆酸盐的相对结合率分别为36.23%、12.81%、95.72%。细胞实验结果显示,不同浓度的TSP能够促进HepG2细胞摄取利用葡萄糖,增加肝糖原合成量,且对细胞活力无影响,低浓度的TSP能够降低α-葡萄糖苷酶的活性,但不显著;在TSP干预下,细胞内SOD酶活性有所上升,表明其在HepG2细胞中能够发挥抗氧化作用。研究结果说明槟榔芋水溶性多糖在体外对糖代谢具有一定的影响,具有潜在的降血糖能力。
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