背景肝纤维化（liver fibrosis）是病毒性肝炎、酒精滥用、非酒精性脂肪肝、胆汁淤积、自身免疫性肝炎、药物或遗传等多种因素引起的慢性肝病的共同病理学基础,是肝硬化形成的早期阶段和必经病理阶段。目前研究表明,肝纤维化是一个可逆转的过程,早期对肝纤维化进行干预,可以减缓、停止或逆转纤维化进程,控制疾病进展,改善预后。近年来,随着纤维化相关研究大量涌现,我们对肝纤维化发病机理的理解取得了巨大进展,新的抗纤维化治疗在实验和临床中都有诸多尝试,但切实有效的治疗方法仍未找到。因此,探讨肝纤维化逆转的分子机制和开发特效的抗肝纤维化药物对于慢性肝病的治疗具有重要的临床意义。凋亡抑制蛋白（Inhibitor of apoptosis proteins,IAPs）是一类抗凋亡蛋白,可以阻断胱天蛋白酶（caspases）激活,继而发挥抗凋亡作用。常见的IAPs有细胞凋亡抑制蛋白 1（cellular inhibitor of apoptosis protein 1,cIAP1）、cIAP2 和 XIAP等,均表达于肝细胞。目前有研究表明IAPs分子可作为一个特发性肺纤维化的潜在治疗靶点。然而,关于IAPs分子在肝纤维化/肝硬化中的作用及作用尚未有研究。目的和意义本课题研究将分析细胞凋亡蛋白IAPs分子在肝纤维化/肝硬化发生发展中的作用,利用靶向基因敲除、IAPs抑制剂在小鼠肝纤维化模型中进行抗纤维化效应的验证,并探索其相关分子机制。研究结果将进一步阐明肝纤维化发生的分子机制及靶向IAPs分子的抗纤维化效应,提示IAPs可能成为肝纤维化的潜在作用靶点。方法此研究中,我们首先采用基因芯片技术分析包含83例慢性乙型肝炎感染者肝组织基因表达谱,分析IAPs分子（cIAP1、cIAP2、XIAP）mRNA表达量与Scheuer评分肝纤维化分期的相关性;采用人肝脏疾病谱组织芯片,进行免疫组化染色,分析肝硬化肝组织和正常对照肝组织中cIAP1、cIAP2蛋白水平;在C57BL/6J小鼠中建立肝纤维化模型,分析IAPs分子的mRNA水平、蛋白水平。其次,通过肝细胞特异性基因敲除、小分子药物靶向抑制IAPs分子的方式观察在CCl4诱导小鼠肝纤维模型中观察抗纤维化效应,并进一步探索纤维化形成和减轻的分子机制。最后利用matrix metalloprotein 9（MMP9）抑制剂、中性粒细胞免疫清除、C-C Motif Chemokine Ligand 5（CCL5）基因敲除进一步验证。结果首先,我们通过基因微阵列分析发现,慢乙肝病人肝组织中cIAP1、cIAP2 mRNA表达与其肝纤维化分期Scheuer-S评分呈正相关,而XIAP无此相关性。在组织芯片中验证cIAP1、cIAP2蛋白水平在人肝硬化组织中较正常人肝组织中表达升高。我们建立小鼠纤维化模型,小鼠肝纤维化组织中cIAP2表达显著上调,与严重程度正相关。其次,在CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型中,肝细胞特异性敲除cIAP2或小分子药物APG-1387靶向抑制cIAPs后肝内胶原纤维染色减轻、胶原面积减少,提示胶原纤维形成减少,肝纤维化改善。进一步机制研究发现靶向抑制cIAPs分子的APG-1387,并不直接促进肝星状细胞的凋亡,不抑制星状细胞激活、纤维生成,而是通过诱导肝细胞分泌趋化因子CCL5,招募中性粒细胞至肝内浸润,上调肝内MMP9表达水平,逆转MMP9/TIMP1失衡,降解细胞外基质,促进胶原纤维降解,从而改善肝纤维化。此外,在小鼠模型中,CTT peptide抑制MMP9酶活性、anti-Ly6G中和清除中性粒细胞、CCL5基因敲除均可阻断APG-1387的抗纤维化效应。结论CIAPs,尤其是cIAP2,参与了肝纤维化的发病发展过程,靶向抑制cIAPs分子通过诱导肝细胞分泌CCL5增加,招募中性粒细胞至肝内浸润,上调MMP9表达,逆转MMP9/TIMP1平衡,降解细胞外基质,从而促进胶原纤维降解,减轻肝纤维化,提示靶向抑制cIAPs有望成为一种有前景的抗肝纤维化治疗方法。