HIV-1转录后调控机制的实验探讨

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该实验绘制出DAEIAV和DLAEIAV转录图谱.为进一步比较两毒株由于外显子-3拼接受体位点(SA2)核苷酸序列差异及源于全基因序列差异对mRNA拼接效率的影响,我们利用RT-PCR法,构建三个真核细胞重组表达质粒,并转染驴白细胞,ELISA检测结果表明EIAV弱毒重组表达质粒CAT蛋白表达量最高,EIAV强毒次之,EIAV强毒突变体最低.由于CAT基因位于EIAV内含子-2中,外显子-2、3之间的拼接可导致该基因删除,因而其表达量反比于EIAVmRNA外显子-2、3之间的接接效率.由于该位点的剪接在不同时空上效率差异对病毒结构蛋白表达非常重要.而实验结果也恰好说明了DLAEIAV转录后调控水平致弱机制的一个因素.
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