苹果组织培养变异的人工诱发和选择

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangfuqun
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本试验以苹果三倍体品种“乔那金”试管苗为试材,通过对苹果离体叶片两步培养法再生的研究,建立了乔纳金苹果试管苗叶片离体再生体系,证明了愈伤组织的发生和激素种类与浓度的关系;并在此基础上研究了愈伤组织再生对不同人工诱变方法(高激素、60Co 辐射、秋水仙素)的反应、被处理愈伤组织再生能力和再生植株性状多样性、以及再生植株不同生理生化角度(外观性状、耐盐性、耐高温性、耐低温性等)的变异性,得到了优良抗性植株并建立了优良变异株系,并从分子水平鉴定再生植株变异程度的结果。主要结果如下:1.实验证明2,4-D 促进愈伤组织的形成和增殖,影响外植体脱分化和再分化的趋向。BA 影响外植体形成愈伤组织的能力,对不定芽再生具有显著作用。IAA 对愈伤组织的形成几乎没有影响,对再生不定芽的生长发育影响较大。诱导愈伤组织培养基为:MS+BA1.0mg﹒L-1+IAA0.2mg﹒L-1+2,4-D0.8 mg﹒L-1,诱导率可达100%;分化不定芽培养基为MS+BA4.0 mg﹒L-1+IAA0.2 mg﹒L-1,最高分化率达100%。暗培养1 月左右即可得到再分化的不定芽。2.通过利用(60)Coγ射线辐照、秋水仙素和不同激素,对乔纳金苹果叶片愈伤组织实施人工诱变,结果表明,60Coγ射线辐照和秋水仙素处理外植体再生易导致再生植株中途死亡,难以得到有效的再生植株。(60)Coγ射线辐照较为适宜的辐照剂量为2400R 左右,秋水仙素处理以0.5%浓度处理28h 为佳。高浓度激素的处理效果优于低浓度,可以诱发高频突变。使用高浓度激素可获得高达50%的外观变异率且死亡率很小。外观变异性状多种多样,以叶片不同特点的变异居多。3.在盐浓度分别是0.2%、0.4%、0.6%的盐胁迫试验中,结果表明随着盐胁迫时间的延长,所有再生苗和对照的综合指数均下降。在不同盐浓度下,高激素再生的芽苗对盐分适应力较强;(60)Coγ射线辐照剂量对再生苗耐盐性影响较大,生长势弱,抗性较弱,综合指数在不同盐浓度下均以3000R 辐照下降最多;运用0.3%、0.5%、0.6%浓度秋水仙素处理28h,再生苗综合指数均大于对照,而处理时间>28h,再生苗综合
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