瘤胃厌氧真菌的筛选、诱变及发酵麸皮的研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:handong007
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本试验对产纤维素酶瘤胃厌氧真菌进行了分离纯化,筛选到一株高酶活的厌氧真菌WA1,并对该菌株的酶学性质、诱变及对麸皮的发酵效果进行了研究,结果如下: 1.以筛选具有纤维素酶活性的瘤胃厌氧真菌为目的,采用的液体增菌、CMC-Na琼脂厌氧培养的方法分离菌株,刚果红染色,应用透明圈直径与菌落直径比值法(H:C)确定其纤维素酶相对活力。结果分离得到一株纤维素酶相对活力高的瘤胃厌氧真菌,经鉴定为Orpinlmyces属菌(O型属菌)。此菌株粗酶液的滤纸酶活(FPase),羧甲基纤维素酶活(CMCase)和水杨素酶活(salicinase)的最适反应pH分别为5.0,5.5和5.0;其pH稳定范围分别为4.0~7.0、4.0~7.5、4.5~5.5;最适温度分别是55℃、50℃和55℃。水杨素酶的热稳定性最好,CMCase次之,滤纸酶活由于是三类纤维素酶组分的综合表现而呈现S型曲线。最适条件下,滤纸酶活高达117U/ml。 2.以诱变筛选高产纤维素酶瘤胃厌氧真菌为目的,采用透明圈法对经紫外线、亚硝基胍复合诱变的瘤胃厌氧真菌进行初选,经紫外线处理100s致死率为68%,经亚硝基胍处理30min致死率为74%,以此作为适宜诱变时间,对瘤胃厌氧真菌孢子进行紫外线加亚硝基胍复合诱变。涂皿培养后得到10株H:C值较大的菌株,传代10次后测CMC酶活进行复选。结果得到了7株高产纤维素酶瘤胃厌氧真菌,其中一株菌酶活OD值比出发菌株提高96%。 3.以研究瘤胃厌氧真菌在不同处理下对麸皮纤维素的发酵效果为目的,经氨水与未氨水处理,分别接种厌氧真菌进行好氧培养、厌氧培养、对照冰箱培养以及未加厌氧真菌室温下放置4类8种处理,在处理的1-8天定时取样,分别采用DNS法分光光度计OD值评价转化效果。结果证明瘤胃厌氧真菌对氨水处理的麸皮在经39℃厌氧培养三天时转化效果最好。
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