背景:蛋白质的翻译后修饰作为拓展蛋白质多样性的重要手段之一,在调控蛋白质功能等方面也发挥着重要的作用。而赖氨酸的琥珀酰化修饰作为近年来新近发现的修饰,其在各个方面扮演的角色还有待进一步探索。有氧酵解的关键酶乳酸脱氢酶A(LDHA)在多种肿瘤包括胃癌组织中具有显著的高表达特性,且其高表达与肿瘤的侵袭和转移能力及患者的预后密切相关。方法:1.通过大通量质谱分析技术分析胃癌及对应的癌旁正常组织中不同蛋白赖氨酸琥珀酰化修饰的水平。2.分别通过定量即时聚合酶连锁反应(q RT‐PCR)、蛋白质印记法(Western blot)、免疫组化等方法检测LDHA在胃癌和癌旁正常组织中的表达水平。3.利用LDHA在赖氨酸第222位点(K222)琥珀酰化的肽段作为抗原制作LDHA在K222位点的特异性琥珀酰化抗体。4.利用免疫共沉淀、免疫荧光共定位、Duolink PLA等实验验证相对应的蛋白之间的相互作用。5.利用慢病毒感染细胞制作稳转细胞系。结果:在本研究中,我们发现LDHA在胃癌患者组织中有一种新的修饰,即在第222赖氨酸位点(K222)的琥珀酰化修饰,且肿瘤组织中的修饰水平显著高于癌旁正常组织。更重要的是该修饰并不影响其本身的泛素化,但却能够减少泛素化的LDHA与P62的结合,减少P62介导的LDHA到溶酶体中的降解,从而延长LDHA的半衰期,增强自身的稳定性。并且过表达模拟琥珀酰化的LDHA突变体后显著的促进了细胞的增值和侵袭能力。更多的是,LDHA的琥珀酰化能够被CPT1A调节。结论:LDHA在K222位点的高琥珀酰化可以减少K63泛素化的LDHA与P62的结合,导致胃癌细胞内LDHA的积累,同时LDHA K222的高琥珀酰化与胃癌患者的不良预后有关,能促进胃癌细胞的增殖和侵袭能力。