毛囊是人体复杂的微小器官,其最主要的功能是生长毛发。作为皮肤的附属器,毛囊具有独特的发育机制和生长规律。由于对毛囊周期循环的信号调控机制认识不足,导致临床上对许多毛发疾病的治疗效果不尽如人意。活化素（Activin,ACT）是转化生长因子-β（transforming growth factor β,TGF-β）超家族成员,参与多种细胞的生长调节。课题组近期研究发现:ACT B促进皮肤创伤愈合,并促进伤口部位毛囊再生;进一步研究发现,ACTB促进小鼠背部毛囊的发育和生长。触须是哺乳动物特殊的触觉器官,触须毛囊是研究毛囊功能、作用、分子影响和毛囊再生的典型模型。然而,目前尚不清楚ACT B对触须毛囊生长的调节作用,同时,ACT B调节毛囊生长的信号机制也尚不明确。本研究拟在前期研究基础上进一步探索ACT B对触须毛囊生长的具体调节作用及机制,为毛囊再生难题提供可能的治疗靶点和理论基础。目标初步阐明ACT B对小鼠触须毛囊生长的调节作用及调控机制。方法1.利用7周龄C57BL/6小鼠构建经典的脱毛诱导模型,每天在小鼠触须部位分别涂抹PBS和10ng/ml ACTB,观察小鼠触须部皮肤颜色变化,利用HE染色观察触须毛囊生长期的分期;进一步建立触须体外器官培养模型,观察ACT B对触须毛囊生长的影响。2.利用EdU检测ACT B对触须毛囊毛母质细胞增殖的影响;培养毛母质细胞,利用CCK-8检测不同浓度ACT B对毛母质细胞增殖的影响;运用PI流式细胞术检测ACT B对毛母质细胞周期的影响;运用AnnexinV-FITC检测ACT B对毛母质细胞凋亡的影响。3.利用Western blot检测ACT B是否影响毛母质细胞中MAPK家族成员ERK、JNK、P38以及下游相关靶蛋白Elk1及CyclinD1的表达。利用CCK8、EdU检测抑制剂SCH772984、SP600125和SB202190是否影响ACT B对毛母质细胞增殖的调控作用。结果1.10 ng/ml ACT B促进小鼠触须毛囊生长:大体观察发现ACT B组小鼠触须皮肤颜色变黑和触须毛干萌出的时间均早于PBS组;HE结果显示ACT B组毛囊周期评分显著高于PBS组;体外器官培养模型发现ACT B组触须毛干生长速度快于PBS组。2.CCK8检测发现5-20ng/ml ACT B促进毛母质细胞增殖,其中1Ong/ml Activin B作用最为明显;EdU实验结果表明10 ng/ml ACT B促进毛母质细胞增殖;PI流式细胞术检测发现ACT B促进毛母质细胞周期由G1期向S期转变;AnnexinV-FITC检测Activin B对毛母质细胞凋亡无影响。3.ACTB激活毛母质细胞中p-ERK、p-JNK和p-P38,促进Elk1和CyclinD1的表达;ERK抑制剂SCH772984抑制ACT B诱导毛母质细胞增殖和Elk1表达;SCH772984抑制ACT B诱导的毛母质细胞周期改变以及CyclinD1表达。结论10 ng/ml ACT B通过ERK信号介导毛母质细胞增殖以及细胞周期由G1期向S期转变,促进小鼠触须毛囊生长。