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目的:检测乙烯硫脲致畸胎鼠直肠末端sonic hedgehog(Shh)基因转录因子Gli2基因表达水平及其在胎鼠后肠发育后期的表达水平的变化,以探讨Shh信号系统与胎鼠后肠发育的关系。
方法:首先用1﹪乙烯硫脲(ethylenethiourea)于孕11d和13d给妊娠Wistar大鼠按125mg/kg灌胃,对照组给予等量蒸馏水,孕16d剖腹取出胎仔,建立动物模型,观察有无畸形,实验组每只母鼠取4只体重相似无肛畸形胎鼠,对照组取4只体重相似正常胎鼠,各取其直肠末端1cm提取RNA,采用半定量RT-PCR检测两组直肠末端Gli2基因表达水平是否有差异。然后再更进一步研究,给妊娠雌鼠于孕11d按125mg/kg胃管注入1﹪乙烯硫脲,对照组给予等量蒸馏水。每组分别于孕12d、14d和16d各处死8只母鼠,每只母鼠剖腹取出4只体重相似的胎鼠,取其直肠1cm提取RNA,RT-PCR法检测Gli2基因表达。比较两组的Gli2基因表达水平及变化趋势。
结论:Gli2基因表达水平减低与先天性无肛畸形的发生密切相关,乙烯硫脲致畸机理之一可能是影响Shh信号转导系统;Gli2基因表达水平在胎鼠后肠发育中具有重要的作用,其基因表达量与胎鼠后肠发育呈剂量依赖效应。