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目的:本研究通过应用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导出Heymann大鼠模型,以盐酸贝那普利为对照,探讨红花黄色素注射液对heymann大鼠的保护作用及对MMP-7、TIMP-1的影响,从而为其临床上治疗原发性膜性肾病提供实验基础和理论支持。方法:选用健康雄性SD大鼠40只,适应性饲养一周,化验尿蛋白阴性,随机选取十只作为正常对照组,其余三十只SD大鼠尾静脉注射C-BSA复制Heymann大鼠模型,每周三次,连续注射4周后,化验24小时尿蛋白定量,确认造模成功后,将三十只heymann大鼠随机分为模型组、贝那普利治疗组、红花黄色素治疗组三组,每组各十只大鼠,贝那普利治疗组给予盐酸贝那普利10mg?kg?d灌胃,红花黄色素治疗组予以红花黄色素注射液26.7mg/(kg·d)腹腔注射,正常组及模型组灌服等量的生理盐水,各组大鼠正常进食进水,连续给药四周。检测尾静脉注射C-BSA四周后及给药治疗四周后大鼠24h尿蛋白定量。检测实验末各组大鼠血清总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr),随后将大鼠处死,留取肾组织,光镜、免疫荧光、电镜观察大鼠肾组织病理变化,原位杂交检测基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)mRNA在肾组织中的表达情况,并用病理图像分析系统进行半定量分析。结果:1、24小时尿蛋白定量测定连续尾静脉注射C-BSA4周后,与正常组比较,造模组出现大量蛋白尿,具有显著性差异(P<0.05);给药4周后,与模型组相比,贝那普利治疗组及红花黄色素治疗组24小时尿蛋白定量明显降低,有统计学意义(P<0.05),两治疗组间比较无明显差异(P>0.05)。2连续给药4周后各组生化指标检测与正常组相比,模型组、贝那普利治疗组、红花黄色素治疗组血清TP、ALB均明显降低TC、TG均明显升高,有显著性差异(P<0.05);与模型组相比,贝那普利治疗组、红花黄色素治疗组血清TP、ALB均明显升高TC、TG均明显降低,有显著性差异(P<0.05);红花黄色素治疗组与贝那普利治疗组相比差异性不明显,无统计学意义(P>0.05);各组大鼠血清BUN、Scr比较,无统计学意义(P>0.05);3肾组织病理形态学观察光镜下观察正常组构无明显改变。模型组大鼠经Masson染色后可见肾小球体积相应增大,肾小球基底膜呈现弥漫性增厚,肾小管上皮细胞出现空泡变性及颗粒变性,肾间质中有部分淋巴和单核细胞浸润,纤维化。红花黄色素治疗组与贝那普利治疗组大鼠肾小球体积仅可见轻微增大,球内细胞有一定的增多。电镜下观察正常组大鼠肾组织内存在极少量电子致密物沉积,足细胞足突排列整齐。模型组大鼠可见肾小球基底膜内多数电子致密物沉积,电子致密物周围大量基底膜增生,细膜基质增生,足细胞足突弥漫融合。红花黄色素治疗组大鼠肾小球基底膜内存在少数电子致密物沉积,部分足细胞足突开始出现弥漫融合。贝那普利治疗组大鼠肾小球基底膜内电子致密物有一定沉积,电子致密物周围基底膜增生增厚,部分足细胞足突呈现出弥漫融合。免疫荧光正常组大鼠表现无明显表现,模型组大鼠肾组织中可见IgG和C3呈细颗粒状沿肾小球内毛细血管壁及部分系膜区呈现不同程度的沉积。红花黄色素治疗组大鼠肾组织中仅可见轻度的IgG和C3沉积,贝那普利治疗组大鼠肾组织中可见IgG和C3呈细颗粒状沿肾小球毛细血管壁呈现少量沉积。4肾组织中TIMP-1、MMP-7 mRNA原位杂交检测结果TIMP-1 mRNA在正常组肾组织的肾小管上皮细胞、肾小球内有少量表达;在模型组和治疗组肾小管上皮细胞和肾小球内均有表达。统计学分析结果显示,与正常组相比,模型组肾小球内TIMP-1表达显著增强,有显著性差异(P<0.05),与模型组相比,治疗组中TIMP-1有所下降,统计学差异显著(P<0.05),两治疗组之间比较无明显差异(P>0.05);MMP-7 mRNA在正常组肾小管中有少量表达,在模型组和各治疗组肾组织中均有表达,主要表达于肾小管上皮细胞的胞浆和肾小球中,与正常组相比,模型组肾脏中MMP-7 mRNA表达明显增强(P<0.05),与模型组相比,两治疗组表达增强(P<0.05),而两治疗组之间比较无显著差异(P>0.05)。与正常组相比,模型组中MMP-7/TIMP-1明显降低(P<0.05),与模型组相比,两治疗组中MMP-7/TIMP-1恢复性上调(P<0.05),两治疗组之间比较无显著差异(P>0.05)。结论:1红花黄色素注射液可显著降低肾病大鼠尿蛋白、提高血浆蛋白、改善血脂代谢,保护肾功能。2红花黄色素注射液能够调节TIMP-1、MMP-7 mRNA在肾组织中的表达,使得MMP-7/TIMP-1比值上调,延缓肾小球硬化,减轻肾脏慢性损伤,延缓膜性肾病进一步发展。3红花黄色素注射液具有对膜性肾病大鼠显著的治疗作用,功效盐酸贝那普利基本相同。