重型再生障碍性贫血患者外周血初始和记忆T细胞亚群表达的探讨

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目的:研究重型再生障碍性贫血(SAA)患者缓解前、后外周血初始和记忆T细胞亚群比例变化,比较初诊组与缓解组T细胞亚群差异,进一步探讨T亚群与疗效的相关性。方法:SAA病例:选取2012年8月至2014年1月收治的SAA患者25例。初诊组16例,其中男8例,女8例,中位年龄33岁(23~67)岁,中位病程2.8(0.3-70)个月,既往均未接受免疫抑制治疗。缓解组9例,其中男6例,女3例,中位年龄28岁(12~60)岁,中位病程2.5(1~8)个月,接受IST(ATG和CsA方案)。正常对照组:健康体检人10例,其中男6例,女4例,中位年龄28.5岁(19~45)岁。所有受试对象均留取清晨空腹血4ml,经人淋巴细胞分离液,分离提取单个核细胞,用于流式细胞术检测。依据CD4+、CD8+T细胞表面CD45RA、CD45RO及CD62L的表达将其分为CD45RA+CD62L+(初始T细胞,na ve T cell,TN)、CD45RO+CD62L+(中央记忆T细胞,central memory T cell,TCM)、CD45RO+CD62L-(效应记忆T细胞,effector memory T cell,TEM)。利用多色流式细胞术检测16例初诊组SAA,9例经IST缓解组和10例正常对照组外周血中CD4+和CD8+TN、TCM、TEM细胞亚群的比例变化,并对比治疗前后血常规变化。结果:1、流式细胞术检测显示,SAA初诊组CD4+细胞比例(12.57±5.86)%,缓解组为(14.24±5.20)%,SAA两组CD4+细胞比例均明显低于正常对照组(24.97±8.91)%,差异有统计学意义(P<0.01)。初诊组CD8+细胞比例(23.83±7.10)%,缓解组为(19.46±9.55)%,正常对照组比例为(16.28±6.43)%,初诊组CD8+细胞比例为高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),初诊组与缓解组、缓解组与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。初诊组CD4+/CD8+比值为(0.53±0.22),缓解组为(0.85±0.49),两组CD4+/CD8+比值均明显低于正常对照组(1.56±0.25),差异有统计学意义(P<0.01),初诊组CD4+/CD8+比值低于缓解组,差异有统计学意义(P<0.05)。初诊组和缓解组CD4+TN、CD4+TCM、CD4+TEM细胞占CD4+细胞比例均明显低于正常对照组,治疗前组表达比例分别为(4.93±3.91)%、(5.96±3.24)%、(3.49±2.76)%,治疗后组表达比例为(5.24±3.71)%、(5.77±3.10)%,(4.85±2.31)%,正常对照组为(9.64±3.54)%、(10.14±3.45)%,(7.40±2.90)%,SAA两组的CD4+TN、TCM及TEM细胞比例均低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),初诊组和缓解组两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。初诊组CD8+TN、CD8+TCM、CD8+TEM细胞占CD8+细胞比例分别为(5.65±4.51)%、(8.28±3.01)%、(6.82±3.37)%,缓解组表达比例为(4.83±4.25)%、(7.53±2.67)%,(4.21±2.49)%,正常对照组为(6.96±3.44)%、(5.84±4.07)%,(3.59±2.53)%,SAA两组的CD8+TN、TCM细胞与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而CD8+TEM细胞初诊组高于缓解组及正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2、CD4+TN、CD8+TN、CD8+TEM细胞比例与年龄呈负相关(r=-0.335,P<0.05;r=-0.469,P<0.05;r=-0.415,P<0.05),而CD4+、CD8+、CD4+TCM、CD4+TEM、CD8+TCM细胞比例与年龄无相关性(r=-0.250,P>0.05;r=-0.198,P>0.05;r=-0.215,P>0.05;r=-0.120,P>0.05;r=-0.320,P>0.05)。3、SAA初诊组血常规水平:WBC1.26x109/L、NUE0.19x109/L、Hb61g/L、Ret3.43×109/L、PLT15.5×109/L。缓解组血常规水平:WBC3.15×109/L、NUE1.22×109/L、Hb108g/L、Ret45.53×109/L、PLT31×109/L,治疗前、后两组WBC、NUE、Hb、Ret、PLT各项比较差异有统计学意义,P均<0.05。结论:SAA患者存在免疫调节机制紊乱,CD8+TEM细胞比例增加。IST可以降低CD8+TEM细胞的比例,提示以ATG联合CsA的IST有效地抑制了CD8+TEM细胞的细胞毒活性,这可能是IST治疗SAA缓解的机制之一。
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