【摘 要】
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目的目前关于孕期和青春期氰戊菊酯暴露对胎儿生长发育影响的研究已经有很多,但是关于父代氰戊菊酯暴露会对子代胎儿宫内生长发育产生何种影响尚未明确。本研究主要探讨父代氰戊菊酯暴露是否会诱发胎儿宫内生长受限以及可能的机制。方法建立父代氰戊菊酯暴露诱发胎鼠宫内生长受限的模型:51只清洁级雄性6周龄ICR小鼠购买于北京维通利华有限公司。在实验开始之前先进行一周的适应性喂养（室内环境温度20～25℃,室内湿度为
【基金项目】
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国家自然科学基金（81773442,81102155）；
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目的目前关于孕期和青春期氰戊菊酯暴露对胎儿生长发育影响的研究已经有很多,但是关于父代氰戊菊酯暴露会对子代胎儿宫内生长发育产生何种影响尚未明确。本研究主要探讨父代氰戊菊酯暴露是否会诱发胎儿宫内生长受限以及可能的机制。方法建立父代氰戊菊酯暴露诱发胎鼠宫内生长受限的模型:51只清洁级雄性6周龄ICR小鼠购买于北京维通利华有限公司。在实验开始之前先进行一周的适应性喂养（室内环境温度20～25℃,室内湿度为50%±5%）。所有小鼠均可自由获得清洁的饮食与饮水,饲养间保持12小时昼夜循环节律。将雄性小鼠随机分为3个处理组,每组17只。氰戊菊酯处理组于在出生后第49天（PND49）到PND84,每天在固定时间通过口服管饲法经口灌胃（2.0,20mg/kg氰戊菊酯,溶于玉米油）。对照组在相应天数内给予玉米油灌胃处理,共计灌胃5周。在灌胃5周结束后,立即将雄鼠与未处理的10周龄ICR雌鼠于每晚9点按1:1进行合笼,次日7点～8点检查雌鼠是否有阴栓形成,查到阴栓的雌鼠则记作妊娠第0天（gestational day0,GD0）。所有孕鼠于GD18天使用眼球取血法处死并剖杀。称量子宫连胎重、记录着床数、活胎数、死胎数、吸收胎、胎仔身长与胎重、胎盘重量与直径、有无畸形。免疫印迹检测胎盘中甲基转移酶Dnmt1（DNA methyltransferase 1,Dnmt1）的表达水平。RT-PCR检测胎盘组织中甲基转移酶1（Dnmt1）、甲基转移酶3a（Dnmt3a）、甲基转移酶3b（Dnmt3b）、胰岛素样生长因子（insulin-like growth factor-2,IGF-2）、胰岛素样生长因子受体（insulin-like growth factor-2 receptor,IGF-2r）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、血管内皮生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor,VEGFr）、基质金属蛋白酶9（matrix metallopeptidase 9,MMP9）、基质金属蛋白酶2（matrix metallopeptidase2,MMP2）、父系表达基因3（paternally expressed gene 3,PEG3）父系表达基因10（paternally expressed gene 10,PEG10）、转化生长因子（transforming growth factor-β,TGF-β）、胎盘生长因子（placenta growth factor,PGF）和小核核糖核蛋白多肽N（small nuclear ribonucleoprotein polypeptide N,SNRPN）的m RNA表达水平。结果与对照组相比,处理组雄鼠体重变化、孕鼠体重变化和孕期增重差异无统计学意义（P>0.05）;处理组每窝的着床数、活产数、死产数和吸收胎数差异无统计学意义（P>0.05）;处理组胎鼠体重明显下降（P<0.05）;处理组胎盘直径和重量差异无统计学意义（P>0.05）。进一步分析发现处理组胎仔IUGR发生率相对于对照组也有明显升高（P<0.05）。与对照组相比,处理组胎仔胎盘中血窦面积减少（P<0.05）,胎盘迷路层厚度呈略微下降的趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）。免疫印迹试验结果表明,与对照组相比,处理组胎鼠胎盘中甲基转移酶Dnmt1的表达水平上调（P<0.05）。RT-PCR结果表明,处理组胎鼠胎盘中MMP9和VEGF的m RNA表达水平下调（P<0.05）,IGF-2、IGF-2r、MMP2、VEGFr、PEG3、PEG10、PGF、TGF-β、SNRPN的m RNA表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论父代氰戊菊酯暴露可诱发子代胎鼠宫内生长受限,并且可能是通过抑制胎盘细胞增殖,影响到了胎盘的正常功能,进而诱发宫内生长受限。
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