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目的:探索结肠癌细胞株SW480在长期分割放疗下获得放射抗拒性的可能机制。方法：经不同剂量0Gy、2Gy、5Gy、10Gy单次X射线照射后，以RT-PCR法检测结肠癌亲本细胞SW480和前期试验在长期分割放疗后筛选出的放射抗拒性细胞SW480-R中cyclin D1基因mRNA的表达；Western blot法检测DNA-PK/AKT/GSK3β通路中两种细胞株cyclin D1、AKT、p-AKT-Ser473、GSK3β、p-GSK3β-Ser9、DNA-PKcs、p-DNA-PKcs蛋白的表达。结果：经单次X射线照射0Gy、2Gy、5Gy、10Gy后，RT-PCT法检测显示SW480-R细胞中cyclin D1基因mRNA的表达明显比SW480为低表达（P＜0.05），其相对表达水平分别为0.31±0.02、0.32±0.03、0.34±0.05、0.44±0.04；Western blot法检测显示SW480和SW480-R中的cyclin D1、AKT、p-AKT-Ser473、p-GSK3β-Ser9、DNA-PKcs及p-DNA-PKcs蛋白的表达含量在两种细胞中显著不同（P＜0.05），SW480-R的蛋白表达均高于SW480（P＜0.05），而GSK3β蛋白的表达含量SW480-R却低于SW480（P＜0.05）。结论：经过长期分割放疗的结肠癌细胞获得的放射抗拒性可能与激活DNA-PK/AKT/GSK3β通路中cyclin D1蛋白过表达的重要变化有关。