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脓毒症(sepsis)仍是一种死亡率很高的疾病,几乎造成约一半患者的最终死亡。最常见的致命并发症之一是受累器官功能障碍,首当其冲的常常是肺脏。将近半数的严重脓毒症患者并发急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)。脓毒症所导致的ARDS的治愈率一直很低,其中一个重要原因是对于ARDS发病的机制目前还不是很明确。晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)是一种具有多种功能的多配体受体,在肺组织有特别高的基础表达水平,主要生理作用是促进肺泡细胞间黏附、协助气体交换。在病理状态下,RAGE通过与不同配体结合后可启动多条信号通路,在ARDS发病过程中起着重要调控作用。乌司他丁(Ulinastatin,UTI)是一种高效的蛋白酶抑制剂,具有广谱的酶抑制作用。已有临床研究发现乌司他丁对脓毒症性ARDS具有显著疗效。但是乌司他丁是否通过调控RAGE表达水平缓解脓毒症性ARDS目前还不明确。本实验旨在通过盲肠结扎穿刺(CLP)的方法建立大鼠脓毒症性急性呼吸窘迫综合征模型,观察肺组织病理损伤、RAGE表达以及乌司他丁干预前、后RAGE表达水平及肺组织损伤的变化,探讨RAGE在脓毒症急性呼吸窘迫综合征发病机制的调控作用以及有效的干预措施。第一部分脓毒症性ARDS大鼠RAGE表达的实验研究目的通过盲肠结扎穿刺(CLP)方法建立大鼠脓毒症性ARDS模型,观察模型大鼠肺组织病理改变及RAGE的表达水平,探讨RAGE表达在脓毒症性ARDS发病过程中的调控作用。方法将Sprague-Dawley大鼠72只随机分为两组:CLP组36只、假手术组(Sham组)36只。CLP组大鼠行盲肠结扎穿刺术制造脓毒症性ARDS模型,Sham组仅做腹部开关,不行CLP。观察两组大鼠造模后一般情况、肺组织病理以及肺组织中RAGE mRNA表达及蛋白水平表达的变化。结果CLP组大鼠术后苏醒延迟,术后2 h出现反应迟钝、进食量减少、活动度下降等表现,并随着时间延长而加重,而Sham组大鼠在术后数小时后饮食、活动等逐渐恢复正常;CLP组大鼠Smith评分明显高于Sham组对应时点(P值均<0.05);CLP组大鼠在造模后6、12、24和48 h时间点肺组织中RAGE mRNA的表达量及RAGE蛋白水平表达均较Sham组显著升高,术后24h均达到峰值(P值均<0.05);CLP组在造模后6、12、24和48 h各时间点肺组织中RAGE mRNA相对表达量与肺组织Smith评分呈正相关(P值均<0.01)。结论CLP致脓毒症性ARDS模型大鼠的肺组织均出现不同程度的病理损伤,损伤肺组织中RAGE mRNA表达及RAGE蛋白表达不同程度升高,损伤程度与肺组织中RAGE mRNA表达水平密切相关,表明RAGE表达可能参与调控脓毒症性ARDS的发病过程。第二部分乌司他丁干预对脓毒症性ARDS大鼠RAGE表达水平影响的实验研究目的建立盲肠结扎穿刺(CLP)致大鼠脓毒症性ARDS模型,观察静脉注射乌司他丁(UTI)前后大鼠肺组织中RAGE mRNA与蛋白水平表达变化以及血浆和支气管肺泡灌洗液(BALF)中RAGE的变化,探讨UTI通过RAGE调控干预脓毒症性ARDS的可能机制。方法将108只Sprague-Dawley大鼠按随机数字法分入假手术组(Sham组)、CLP组、UTI组,每组36只。Sham组麻醉后只行开关腹,不行CLP,术毕腹壁皮下不注射0.9%氯化钠溶液。CLP组和UTI组大鼠均行CLP制造脓毒症性ARDS模型。造模成功后30 min,Sham组和CLP组大鼠通过尾静脉注射0.9%氯化钠溶液2mL,UTI组大鼠通过尾静脉注射UTI 10万U/kg加0.9%氯化钠溶液至2 mL,均为每12 h重复1次。各组大鼠分别于造模后6、12、24和48 h,检测肺组织病理改变、肺组织中RAGE mRNA相对表达量、肺组织中RAGE蛋白水平表达以及血浆和BALF中的RAGE水平变化。结果UTI组在造模后12、24、48 h的肺组织Smith评分均显著低于CLP组同时间点(P值均<0.05);UTI组和CLP组在造模后6、12、24、48 h的肺组织Smith评分均显著高于Sham组同时间点。UTI组在造模后6、12、24和48 h各时间点的肺组织中RAGE mRNA的相对表达量和RAGE蛋白水平表达,血浆和BALF中的RAGE表达均显著低于CLP组同时间点(P值均<0.05);CLP组在造模后6、12、24和48 h各时间点的肺组织中RAGE mRNA的相对表达量和蛋白表达量,血浆和BALF中的RAGE表达均显著高于Sham组同时间点(P值均<0.05)。结论CLP致脓毒症性ARDS模型动物肺组织均出现不同程度的损伤,静脉注射UTI后能明显降低肺组织中RAGE mRNA表达和蛋白表达,降低血浆和BALF中的RAGE水平,表明静脉注射UTI可能通过抑制RAGE表达减轻脓毒症性ARDS肺组织的损伤程度。