西洋参皂苷Rb1的提取及抗氧化活性的研究

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西洋参(Panax quinquefolius),也被称为花旗参,属于五加科,人参属,多年生草本。由于西洋参具有独特的药理作用,近年来,越来越多的受到各国研究学者的喜爱。本文以西洋参为原料,研究了提取分离西洋参中人参皂苷的试验方法,为了提高人参皂苷的提取率,在原有的传统提取方法基础上,用12倍量的乙醇反复提取,同时采用大孔树脂吸附法将色素等杂质除去,真空浓缩得到人参皂苷浸提液,冷冻干燥后,通过高效液相色谱法对人参总皂苷及单体皂苷进行定性定量的分析,最后采用化学发光法对人参总皂苷和人参皂苷Rb1的抗氧化性进行了研究。采用醇-吸附树脂法提取分离人参皂苷,探索出一种简便易行且皂苷得率高的洗脱方法。从外观、气味、干燥时间、皂苷损失量、复水性等方面对真空冷冻干燥法和传统干燥法进行了比较,确定了真空冷冻干燥法在干燥人参皂苷方面的优点。采用HPLC法测定了提取的人参皂苷样品中Rb1和Re的含量,比较了单体皂苷含量的差异,实验采用Agilent1100系统,Agilent Extend-C18柱(5μm,250×4.6mm),柱温35℃,检测波长为203nm,流速为1.0mL/min,流动相组成为已腈和超纯水,乙腈和超纯水的比例为7:3,进样量为20μL。测定结果表明,在实验的提取分离方法下得到的单体皂苷Rb1和Re含量较高,该方法在分析人参皂苷组成方面简便有效。为了检测西洋参皂苷的抗氧化活性,本实验采用化学放光法分别测定西洋参中人参总皂苷和人参皂苷Rb1的清除羟自由基能力和清除超氧阴离子能力。采用CuSO4-Luminol-Vc-H2O2体系测定清除羟自由基能力;邻苯三酚-鲁米诺化学发光体系测定清除超氧阴离子能力结果表明,提取的人参总皂苷具有很强的清除自由基和清除超氧阴离子的能力,IC50值分别为1.23mg/mL和0.048mg/mL,显示了很强的抗氧化活性;人参皂苷单体Rb1清除自由基和清除超氧阴离子的能力稍弱,IC50值分别为3.19mg/mL和2.20mg/mL,显示了较强的抗氧化活性。实验结果表明:以Vc做阳性对照,所测人参总皂苷及单体皂苷Rb1表现出的抗氧化活性均强于天然抗氧化剂Vc,并呈现量效关系。
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