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羊栖菜(Hizikia fusiforme)素有“长寿菜”美称,被推崇为益寿食品。多糖是羊栖菜中含量最多的特色成分,具有广泛的生物活性。本实验对羊栖菜多糖进行提取、分离纯化,以及抗氧化、抗衰老活性的研究。羊栖菜干粉经乙醇回流脱脂后,水煮醇沉得水溶性粗多糖,提取率31.54%。水溶性粗多糖进一步分离得到褐藻糖胶、褐藻胶和褐藻淀粉,其中褐藻糖胶的提取率为3.97%。褐藻糖胶经大孔树脂D101脱色,得到脱色褐藻糖胶(SFPS),样品回收率92.46%。脱色后的褐藻糖胶(SFPS)利用DEAE-Sepharose Cl-6B进行分级纯化,得到三个级分SFPS-F1、SFPS-F2和SFPS-F3。理化性质分析结果显示,SFPS、SFPS-F1和SFPS-F2的糖含量分别为81.93%、97.00%、72.09%,糖醛酸含量分别为4.27%、6.67%、3.24%,蛋白质含量分别为2.39%、2.51%、2.97%。经高效液相色谱检测,SFPS的分子量为3.1×105、7.9×104和6.7×103 Da,SFPS-F1分子量为3.8×105和9.2×104 Da,SFPS-F2的分子量为2.7×105和6.3×104 Da。利用高效液相色谱检测单糖组成,SFPS的单糖组成为:50.4%Fuc、18.29%Gal、15.1%Man、8.05%Xyl、7.55%Glc A、0.61%Rha,SFPS-F1的单糖组成为:43.32%Fuc、15.09%Gal、19.96%Man、11.39%Xyl、9.7%Glc A、0.54%Rha,SFPS-F2的单糖组成为:53.66%Fuc、18.64%Gal、15.27%Man、6.93%Xyl、5.5%Glc A。利用化学方法检测SFPS、SFPS-F1和SFPS-F2的抗氧化活性。结果表明这三种多糖具有较强的清除羟自由基和DPPH自由基的能力,并且清除能力依次为SFPS>SFPS-F1>SFPS-F2;当多糖浓度相同或相近时,羊栖菜多糖对羟自由基的清除率略小,而其对DPPH自由基的清除率则较大。以MRC-5细胞为对象,研究羊栖菜褐藻糖胶粗多糖表观抗衰老作用。首先确定细胞建模的过氧化氢的最佳浓度为10μM、15μM和20μM,处理时间为1 h或2 h。然后利用600μg/m L、800μg/m L和1000μg/m L浓度的多糖对其进行药物靶向作用,用β-半乳糖苷酶染色试剂进行染色,结果显示三种浓度的多糖均起到了抗衰老的作用,但组别间差别不大。对于过氧化氢的促衰老中,在10μM和15μM浓度诱导衰老的细胞中,多糖抗衰老作用较为显著,而多糖对20μM浓度诱导的衰老细胞没有明显的抗衰老作用。利用黑腹果蝇为模型,研究热提羊栖菜褐藻糖胶粗多糖表观抗衰老作用。结果显示,果蝇的平均寿命为59.8±8.3 d,最高寿命为81.1±3.5 d,低、中剂量组和对照组的平均寿命及最高寿命差异不显著(p>0.05),高剂量组与对照组与空白对照组的平均寿命及最高寿命相比差异显著(p<0.05),分别增加了18.1%和12.0%。本研究发现,雌性果蝇寿命高于雄性,故此对两种性别的果蝇寿命分别进行统计分析。与对照组相比,多糖处理组对雌性果蝇的平均寿命的影响未达到显著水平(p>0.05),但高剂量多糖组雌性果蝇的最高寿命增加了9.4%(p<0.05);中、低多糖处理组对雄性果蝇的平均寿命和最高寿命的影响未达到显著水平(p>0.05),但高糖处理组的雄性果蝇平均寿命比对照组增加30.9%(p<0.05)最高寿命增加了14.6%(p<0.01)。由此可知,羊栖菜多糖具有抗衰老作用。