二氯乙烷降解菌的分离鉴定及降解特性研究

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随着工业的快速发展,1,2-二氯乙烷(1,2-DCA)的广泛应用及高毒性使它带来的环境问题与健康问题日益突出。与传统的物理、化学法相比,生物法处理具有效率高、能耗低且无二次污染等优点,在环境污染修复中具有广泛的应用前景。本研究从浙江某化工厂污水处理池的活性污泥中筛选分离到一株能以1,2-DCA为唯一碳源和能源生长的菌株T-2,通过对其形态特征、生理生化特性及16S rRNA基因序列分析,确定该菌株为Starkeya sp..查阅相关文献,推断T-2可能为降解1,2-DCA的新菌株,该菌株在GenBank中的登录号为JN606070,并保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏号为M2011263。菌株T-2生长和1,2-DCA降解的最适温度为30℃,最适pH为7.0~8.0;在最适温度和pH条件下讨论了 T-2生长和1,2-DCA降解的规律;通过单因素控制实验考察了底物浓度、外加碳源(酵母粉)、Cl-浓度、不同氮源、(NH4)2SO4浓度、微量元素、氧气浓度等因素对菌株T-2降解1,2-DCA的影响,结果表明:菌株T-2能快速完全降解低浓度的1,2-DCA,当1,2-DCA浓度达到800mg·L-1时,不能实现完全降解;酵母粉的加入能促进菌株T-2的生长和1,2-DCA的降解;菌株T-2耐盐浓度较高,Cl-浓度达到15 g·L-1时降解速率才有所下降;T-2对氮源具有普遍适用性,(NH4)2S04作为最经济的氮源,在无机盐培养基中最适浓度为1.8 g.L-1;微量元素中,菌株T-2受Co、Zn、Cu的影响较大,培养基中缺失这些微量元素时降解效率都会明显下降;菌株T-2降解1,2-DCA还需要一定浓度的氧气。菌株T-2降解1,2-DCA的过程遵循Haldane动力学模型,其最大比生长速率μmax为0.065 h-1,最大比降解速率vmax为0.54 h-1;菌株T-2以1,2-DCA生长的细胞产率系数(以1,2-DCA计)为0.191 mg·mg-1,生长的过程中能同时把1,2-DCA最终矿化为CO2和H2O,通过测定1,2-DCA降解后菌体生物量、CO2生成量、TOC量及Cl-释放量来分析降解过程中的碳平衡、氯平衡和矿化率情况,得到最终矿化率为45%。1,2-DCA的降解主要是菌体细胞起作用,且这些菌体细胞不需要经过1,2-DCA的诱导就可以直接降解1,2-DCA,且对1,2-DCA具有较高的底物专一性;利用GC-MS方法检测到1,2-DCA降解过程中主要的中间产物2-氯乙醇,推测菌株降解1,2-DCA可能的代谢途径为:1,2-DCA先脱掉一个C1生成2-氯乙醇,2-氯乙醇经过两次的氧化生成氯乙酸,氯乙酸再脱掉另外一个C1后转化为不含氯的简单有机物进入生化反应循环。
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