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目的2018年全球癌症统计报告显示,胃癌发病率和死亡率分别位居世界第五位和第三位。胃癌死亡的主要原因是胃癌的复发和转移。近年来,越来越多的文献报道BOP1在某些肿瘤组织中高表达,并通过影响细胞生长、增殖和EMT促进肿瘤发生发展以及侵袭转移。然而,关于BOP1在胃癌中的作用尚无文献报道。本课题主要以胃癌细胞AGS和BGC-823为研究对象,探讨BOP1在胃癌中的表达,以及其对胃癌发生发展和转移侵袭中的作用和机制。方法(1)为研究BOP1在胃癌中的表达,采用Elisa、RT-PCR或Western Blot方法检测正常人和胃癌患者的血清和组织以及胃癌细胞中BOP1 mRNA和蛋白的表达水平。(2)使用不同siRNA序列沉默胃癌细胞中BOP1基因的表达,采用RT-PCR和Western Blot方法检测转染后胃癌细胞中BOP1 mRNA和蛋白的表达水平情况,选择合适的siRNA序列。(3)为探讨BOP1对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,用siRNA沉默胃癌细胞中的BOP1基因的表达,采用CCK-8法、平板集落形成实验、伤口愈合实验和Transwell实验测定各组细胞增殖、迁移和侵袭的能力。(4)为研究BOP1对胃癌细胞作用的分子机制,进一步研究BOP1对PI3K/AKT信号通路的影响,收集转染后的各组细胞,检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白的表达。(5)为探讨胃癌细胞中BOP1基因对P53基因和c-Myc基因表达的影响,沉默胃癌细胞中BOP1基因后,采用Western Blot法检测细胞中P53和c-Myc蛋白的水平。结果(1)与正常人的血清、胃组织和胃粘膜上皮细胞相比,胃癌患者的血清、胃癌组织和胃癌细胞中BOP1 mRNA和蛋白的表达水平上调。(2)转染结果显示:在胃癌细胞AGS和BGC-823中,siRNA1序列和siRNA2序列转染胃癌细胞后的BOP1 mRNA和蛋白水平最低,选择siRNA-1序列和siRNA-2序列转染胃癌细胞AGS和BGC-823用于后续的实验。(3)结果显示:在CCK-8法、平板集落形成实验、伤口愈合实验和Transwell实验中,与BC组和si-NC相比,si-BOP1组细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显下降。(4)与癌旁组织相比,胃癌患者胃癌组织中GSK3β蛋白质的表达水平明显降低;敲低BOP1基因后的胃癌细胞中GSK3β的表达显著升高;与BC组和si-NC组相比,si-BOP1组细胞中总PI3K和总AKT蛋白水平无明显变化,p-PI3K和p-AKT蛋白水平明显下降。(5)与BC组和si-NC组相比,si-BOP1组细胞中P53蛋白的表达水平明显升高,c-Myc的表达水平明显下降。结论与正常人的血清、胃组织和胃粘膜上皮细胞相比,BOP1在胃癌患者的血清、胃癌组织和胃癌细胞中的表达显著升高,提示BOP1与胃癌的发生发展具有密切联系。通过采用siRNA敲除技术、CCK-8实验、平板集落形成实验、伤口愈合实验和Transwell实验研究发现,BOP1可促进胃癌的增殖、迁移和侵袭能力,且发现BOP1可能通过PI3K/AKT/GSK3β信号通路影响胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。沉默BOP1基因后下调c-Myc和上调P53蛋白的表达,提示BOP1也可能通过影响癌基因和抑癌基因的表达促进胃癌的发生发展。