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【研究背景与目的】甲醛(formaldehyde,FA)是一种有毒性气体,已经证实当甲醛在体内代谢失衡时,容易引起大脑组织氧化受损,诱导神经毒性。硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)是一种具有抗氧化作用的内源性气体分子,具有抗氧化和保护神经的作用。铁死亡(ferroptosis)是一种氧化型细胞死亡方式,与多种神经变性疾密切相关。本文将探讨硫化氢是否可拮抗甲醛诱导的大鼠海马铁死亡,为甲醛的神经毒性的防治提供新思路。【方法】1.Western blotting检测大鼠海马组织中谷胱甘肽过氧化物酶4(Glutathione-dependent antioxidant enzyme glutathione peroxidase 4,GPX4)的表达;2.酶联免疫吸附法(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测大鼠海马组织中谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、4-羟基壬烯醛(4-Hydroxynonenal,4-HNE)的含量;3.C11-BODIPY染色流式细胞术检测大鼠海马组织中脂质活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平;4.Calcein-acetoxymethlester(Ca-AM)染色流式细胞仪检测大鼠海马组织中Fe2+含量;5.透射电镜观察大鼠海马组织CA3区线粒体平均横切面的大小;【结果】1.甲醛诱导大鼠海马铁死亡的作用大鼠通过侧脑室微量注射2.5μL不同浓度的FA,连续7天后,取海马进行检测:1.1 Elisa法检测大鼠海马组织中GSH、MDA、4HNE含量,结果显示FA(0.1,1,10μM)呈浓度依赖性的降低组织GSH水平和增加MDA、4HNE的含量;1.2 Western blotting检测海马组织中GPX4的水平,结果显示FA(0.1,1,10μM)呈浓度依赖性降低GPX4水平的表达;1.3染色流式检测海马组织中脂质ROS、Fe2+含量,结果显示FA(10μM)可显著增加海马脂质ROS以及Fe2+含量;1.4透射电镜检测海马CA3区内线粒体平均横切面积的大小,结果显示FA(10μM)可明显缩小线粒体平均横切面积;2.硫化氢对甲醛诱导大鼠海马铁死亡的拮抗作用大鼠通过腹腔注射H2S供体NaHS(10,30,100μmol/kg)7 h后,再通过侧脑室微量注射2.5μL的FA(1μM),连续给药7 d后,取海马组织进行如下检测:2.1 Elisa法检测大鼠海马组织GSH、MDA、4HNE含量,结果显示NaHS(10,30,100μmol/kg)可拮抗FA(1μM)诱导的海马组织GSH水平的降低和MDA、4HNE含量的增加;2.2 Western blotting检测海马组织GPX4水平,结果显示NaHS(10,30,100μmol/kg)可逆转FA(1μM)导致的海马组织GPX4水平的降低;2.3染色流式术检测海马组织ROS、Fe2+含量,结果显示NaHS(10,30,100μmol/kg)可减少FA(1μM)诱导的海马组织ROS以及Fe2+含量的增多;2.4透射电镜观察海马CA3区线粒体平均横切面积的大小,结果显示NaHS(30,100μmol/kg)可明显逆转FA(1μM)引起的海马组织线粒体平均横切面积的缩小;【结论】硫化氢可拮抗甲醛诱导大鼠海马铁死亡