论文部分内容阅读
研究背景和目的：分化相关基因NDRG1（N-Myc downstream-regulated gene1）属于 N-myc下游调节基因蛋白家族一成员，因在 N-myc全身性敲除的小鼠胚胎组织中高表达而得此名。NDRG1表达于多种肿瘤组织中，如肺癌、食管癌、乳腺癌、肝癌、前列腺癌、肾癌结肠癌；在某些肿瘤中，NDRG1的表达水平与细胞分化程度、临床分期、转移和侵袭有关。然而，目前人们对NDRG1在肝肿瘤和肠肿瘤中的表达的生物学意义仍不十分清楚。本研究旨在探讨NDRG1对人肝癌和肠癌细胞生长的体外生物学效应。 实验结果：初步分析了15对肝癌和癌旁组织及不同肝癌和肠癌细胞系中NDRG1的表达情况，发现NDRG1在人肝癌组织样本中的mRNA表达显著高于相应的癌旁组织；在多数的肝癌和肠癌细胞系中，NDRG1蛋白有一定水平表达。为进一步研究NDRG1的功能，利用慢病毒系统将NDRG1表达单元转入人肝癌细胞系Huh7、SMMC-7721和人肠癌细胞系 SW620、HCT8中，并建立了相应的过表达稳定细胞系。MTT、克隆形成和细胞周期结果显示，在细胞贴壁培养条件下，过表达NDRG1并不影响上述肝癌细胞生长与增殖；而在非贴壁培养条件下，NDRG1表达却可显著地抑制肝癌细胞的失巣凋亡，相伴随的是磷酸化的AKT和p-38MAPK水平增高；在HepG2和Hep3B细胞中，敲降NDRG1表达促进这两种肝癌细胞的失巢凋亡。在细胞贴壁培养下，过表达NDRG1并不影响肠癌HCT8和SW620细胞的生长与增殖，但能够抑制细胞的失巢凋亡；敲降NDRG1表达可诱导HCT116细胞发生凋亡，并可抑制细胞中Bcl-xl的表达。相应的是，敲降NDRG1表达可以促进肠癌细胞HCT116和Lovo细胞的失巢凋亡。 实验结论：NDRG1参与调控人肝癌和肠癌细胞的生存。NDRG1可抑制肝癌及肠癌细胞发生失巣凋亡。NDRG1抗凋亡效应中存在AKT信号的活化和促细胞生存因子Bcl-xl表达增强现象。