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目的研究短期使用雷帕霉素联合调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)在诱导同种异体小鼠心脏移植物长期存活,同时探讨此方案对移植受体肿瘤免疫的影响。方法免疫磁珠法分离得到受体小鼠脾脏Treg,经CD3/CD28单克隆抗体磁珠及2000 U/mL重组小鼠白介素2(recombinant murine IL-2,rmIL-2)体外扩增后,流式细胞术检测纯度;建立小鼠腹腔同种异体心脏移植模型(H-2~b到H-2~d),分为对照组(单纯移植)、雷帕霉素组、雷帕霉素联合Treg组。雷帕霉素组连续14 d经腹腔注射雷帕霉素1mg/(kg·d),雷帕霉素联合Treg组注射相同剂量的雷帕霉素,并于移植当天经尾静脉过继输注扩增后的Treg(1×107/只),同时设同基因移植组(H-2~d到H-2~d),每日观察移植心脏搏动并在相应时点进行组织学评价。在受体肿瘤免疫实验中设三组同种异体心脏移植(H-2~b到H-2~d),同时经尾静脉过继输注B16-F10细胞(H-2~b)(供体来源),另三组同种异体心脏移植(H-2~d到H-2~b)小鼠经尾静脉过继输注B16-F10细胞(H-2~b)(受体来源),两周后比较肺部肿瘤结节数量。结果CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg扩增前纯度为86.68%±0.02%(n=5),体外加入扩增2周后Treg数量达到了初始数量的30~40倍,流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+Treg纯度为84.58%±0.03%,与扩增前相比差异无统计学意义(P>0.05)。对照组移植心脏中位生存时间(MST)为7 d,雷帕霉素组为15 d,雷帕霉素联合Treg过继输注能够显著延长移植心脏MST至93 d,组织学显示长期存活心脏淋巴细胞浸润及慢性血管病变;对于供体来源肿瘤,对照组未见肿瘤结节,雷帕霉素组为(15±8)个,雷帕霉素联合Treg组小鼠肺部肿瘤结节为(14±7)个,后2组类似无显著性差异;对于受体来源肿瘤,对照组肿瘤结节为(70±12)个、雷帕霉素组为(28±9)个、雷帕霉素联合Treg组小鼠肺部肿瘤结节为(146±12)个,与对照组、雷帕霉素组相比均显著增加。结论短期使用低剂量雷帕霉素联合Treg能够显著延长小鼠移植心脏的存活时间,但仍不能抑制受体肿瘤的发生。