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目的：本试验通过对原发性乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞及肿瘤干细胞的检测，分析循环肿瘤细胞及肿瘤干细胞与乳腺癌的临床分期，组织病理学指标及预后的关系。探讨运用流式细胞仪检测乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(Circulating tumor cells，CTC)及肿瘤干细胞（Tumor stemcells，TSC）的临床价值。方法：1抽取自2011年8月至2012年1月河北医科大学省四院乳腺中心60例原发性乳腺癌患者外周血10ml，人淋巴细胞分离液制备外周血单个核细胞悬液（peripheral blood mononuclear cell, PBMC），同期抽取15例健康志愿者外周血10ml作为对照组。2外周血单个核细胞平分为试验管和阴性对照管，试验管分别标记细胞角蛋白（cytokeratin, CK）19单克隆抗体、鼠抗人单克隆抗体CD44、鼠抗人单克隆抗体CD24。阴性对照管分别加入CK19、CD44、CD24的同型对照抗体。在相同的条件下操作完成标记。3标记好的外周血单个核细胞通过流式细胞仪，检测CK19+及CK19+/CD44+/CD24-/low的细胞比例，分别作为乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞及肿瘤干细胞的标志。4所得结果用SPSS13.0统计软件包进行处理，实验结果应用X2检验进行统计分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。结果：160例原发性乳腺癌患者外周血中32例检测出CTC，CTC的阳性率为53.33%(32/60)，15例健康志愿者外周血中有一例检出CTC，CTC的阳性率为6.67%（1/15），两组循环肿瘤细胞的阳性率差异具有统计学差异（P=0.001）。260例原发性乳腺癌患者根据临床TNM分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期)不同，患者CTC阳性率分别为21.43%(3/14)、54.17%(13/24)、66.67%(12/18)和100.00%(4/4)，各组CTC阳性率差异有统计学意义(P=0.006)；根据淋巴结转移状况(pN0、pN1-3期)不同，患者CTC阳性率分别为34.62%(9/26)、67.65%(23/34)，两组CTC阳性率差异有统计学意义(P=0.018)；根据临床原发肿瘤大小（T1、T2、T3、T4期）不同，患者CTC阳性率分别为40.00%(8/20)、61.11%(11/18)、60.00%(12/20)、50.00%(1/2)，各组CTC阳性率差异无统计学意义(P>0.05)；ER阴性患者CTC的阳性率66.67%(12/18)较ER阳性患者CTC的阳性率47.62%(20/42)高， PR阴性患者的CTC的阳性率68.42%(13/19)较PR阳性患者CTC的阳性率46.34%(19/41)高，但两者均无统计学差异（P>0.05）。C-erbB2阳性的患者CTC的阳性率66.67%(8/12)较C-erbB2阴性的患者CTC的阳性率55.00%(22/40)高，但两者无统计学差异（P>0.05）；根据分子亚型（Luminal型、HER-2型和Basle-like型）的不同，患者CTC阳性率分别为41.38%(12/29)、80.00%(8/10)、76.92%(10/13)，各组CTC阳性率差异有统计学意义(P=0.0240)，HER-2型和Basle-like型患者CTC阳性率分别较Luminal型患者显著升高，但HER-2型和Luminal型患者之间无统计学差异（p>0.05），Basle-like型和Luminal型患者之间具有统计学差异（p=0.047）。332例CTC阳性的乳腺癌患者中，15例检测到循环肿瘤干细胞，根据临床TNM分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期)不同，患者循环肿瘤干细胞的阳性率分别为33.33%(1/3)、38.46%(5/13)、50.00%(6/12)和75.00%(3/4)，随着临床分期的增加CTC的阳性率有增高趋势，但各组之间差异无统计学意义(P>0.05)；根据淋巴结转移状况(pN0、pN1-3期)不同，患者循环肿瘤干细胞的阳性率分别为55.56%(5/9)、43.48%(10/23)，两组之间差异无统计学意义(P>0.05)；根据临床原发肿瘤大小（T1、T2、T3、T4期）不同，患者循环肿瘤干细胞的阳性率分别为37.50%(3/8)、45.45%(5/11)、58.33%(7/12)、0%(0/1)，各组之间差异无统计学意义(P>0.05)；ER阴性患者循环肿瘤干细胞的阳性率50.00%(6/12)较ER阳性患者CTC的阳性率45.00%(9/20)高， PR阴性患者的循环肿瘤干细胞的阳性率为46.15%(6/13)，PR阳性患者循环肿瘤干细胞的阳性率为47.37%(9/19)，两者无统计学差异（P>0.05）。C-erbB2阳性的患者循环肿瘤干细胞的阳性率62.50%(5/8)较C-erbB2阴性的患者循环肿瘤干细胞的阳性率45.45%(10/22)高，但两者无统计学差异（P>0.05）；根据分子亚型（Luminal型、HER-2型和Basle-like型）的不同，患者循环肿瘤干细胞的阳性率分别为35.71%(5/14)、66.67%(4/6)、60.00%(6/10)， HER-2型和Basle-like型患者循环肿瘤干细胞的阳性率分别较Luminal型患者显著升高，但各组之间均无统计学意义(P>0.05)。结论：1运用流式细胞仪技术，原发性乳腺癌患者外周血中可以检测到循环肿瘤细胞及肿瘤干细胞。2本研究表明乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞与乳腺癌的不良生物学行为有关，其临床分期越晚，有淋巴结转移者，乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞的检出率越高，且具有统计学意义。而与原发肿瘤的大小无关联性。乳腺癌患者外周血循环肿瘤干细胞随着临床分期越晚，有淋巴结转移者，其阳性率表现增高趋势，但无统计学意义。3乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞的阳性率与ER、PR、C-erbB2表达及乳腺癌分子亚型等密切相关。ER阴性、PR阴性患者CTC的阳性率较ER阳性、PR阳性患者的阳性率高、但均无统计学差异。C-erbB2阳性患者较C-erbB2阴性患者CTC及循环肿瘤干细胞的阳性率高，但无统计学差异。HER-2型和Basle-like型患者CTC阳性率分别较Luminal型患者显著升高，HER-2型和Luminal型患者之间无统计学差异（p>0.05），Basle-like型和Luminal型患者之间具有统计学差异（p=0.047）。4乳腺癌患者外周血循环肿瘤干细胞的阳性率与ER、PR、C-erbB2表达及分子亚型等密切相关。ER阴性患者CTSC的阳性率较ER阳性患者的阳性率高、PR阳性患者CTSC的阳性率较PR阴性患者的阳性率高，但均无统计学差异。C-erbB2阳性患者较C-erbB2阴性患者CTSC及循环肿瘤干细胞的阳性率高，但无统计学差异。HER-2型和Basle-like型患者CTSC阳性率分别较Luminal型患者显著升高，但三者之间无统计学差异（p>0.05）。